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  • 發布時間:2020-08-17 17:37 原文鏈接: α酮戊二酸脫氫酶的測定

    實驗方法原理


    實驗材料 α-酮戊二酸脫氫酶

    試劑、試劑盒 磷酸鉀MgCl2α-酮戊二酸焦磷酸硫胺素K3[Fe(CN)6]牛血清蛋白

    儀器、耗材 分光光度計

    實驗步驟

    實驗所需「試劑」具體見「其他」


    0.98 ml 實驗混合物



    0.02 ml 酶樣品


    30℃ 時,于 436 nm 處吸收值發生變化,ε436=755 l/(mol·cm)

     

    注意事項

    其他

    試劑:


    0.1 mol/L 磷酸鉀,pH 6.5


    0.1 mol/LMgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水中)


    0.5 mol/L α-酮戊二酸(α-酮戊二酸鹽,Mr=190.1,二鈉鹽,0.95 g 溶于 10 ml 水中)


    0.01 mol/L 焦磷酸硫胺素(ThDP,脫羧輔酶,Mr=460.8;46.1 mg 溶于 10 ml 水中),


    0.1 mol/L K3[Fe(CN)6](Mr=329.2;330 mg 溶于 10 ml 水中)


    1% 牛血清蛋白(BSA,100 mg 溶于 10 ml 水中)


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  • 调性视频