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  • 發布時間:2022-02-17 13:37 原文鏈接: βN乙酰氨基葡萄糖苷酶檢查過程

      1.對硝基酚比色法混合,在405nm波長,1cm光徑,蒸餾水調零,讀取各管吸光度,用(AU-AC)之差查標準曲線。

      ①基質對硝基酚應純化,配制前置50℃烘24h。用10mmol/L NaOH配成0.04mmol/L濃度,用窄帶寬分光光度計掃描吸收曲線,λmax=401nm,根據IFCC標準,Aλmax=0.7316~0.7388,Eλmax=18380±90(25℃)。根據對硝基酚的摩爾吸光系數

      ②底物溶解度小,配制時應先用適量pH 4.6緩沖液調成糊狀,再逐漸加緩沖液至所需量。

      ③測定結果超線性范圍時,應將標本用生理鹽水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數。

      ④尿酶濃度受尿量影響較大,應留取24h尿量。若以NAG/g肌酐比值計算酶排出率,即不受尿濃縮或稀釋的影響,又不需留24h尿。

      2.熒光光度法:先將血清或尿用不含牛血清白蛋白(BSA)的緩沖液作20倍稀釋,

      混勻,激發波長364nm,發射波長448nm,以終止液調零,6μmol/L 4-MU管調熒光強度至100后,分別測空白管及測定管的熒光強度。

      ①熒光法測NAG已有國產試劑盒,其敏感度高,不受尿色干擾。

      ②也可用上海第三分析儀器廠產930熒光光度計,激發濾光片360,發射濾光片用(400450)復合,效果滿意。

      ③本法酶反應液中各成分濃度為:底物1.33mmol/L,枸櫞酸20mmol/L,Na2HPO432mmol/L。

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