α-半乳糖苷酶（α-galactosidase，α-gal，EC 3.2.1.22）是催化α-半乳糖苷鍵水解的一種外切糖苷酶，因能分解蜜二糖，又稱蜜二糖酶，它能催化α-半乳糖苷鍵的水解。這一特點使得它可用于改善和消除飼料及豆制食品中的抗營養成分。此外，它在醫學領域中能實現B→O血型轉變、制備通用型血，以及在法布里病的酶替代治療中也發揮了重要作用。α-半乳糖苷酶還可作用于含α-半乳糖苷鍵的復合多糖、糖蛋白和鞘糖。
某些α-半乳糖苷酶在底物濃度高度富集的情況下還具有轉半乳糖基作用，利用這一特點可用于低聚糖的合成及制備環糊精衍生物。開發嗜中性或具pH 穩定性的α-半乳糖苷酶，尋找高產酶量的微生物或植物，成為近幾年的研究熱點。許多耐熱α-半乳糖苷酶也因其特殊性逐漸引起了科學家們的廣泛興趣，期望利用其熱穩定性在工業方面發揮更大的利用價值，以及在科技工藝和醫藥領域顯示出更廣闊的應用前景。