?酶的純化與酶的固定化技術介紹

酶的純化

酶的純化屬于一種后處理工藝，包括粗制工藝與精制工藝，對超酶液進行濃縮精制是生產高質量酶制劑的重要環節。其提純手段一般是依據酶的分析大小、形狀、電荷性質、溶解度、專一結合位點等性質而建立。要得到純酶,一般需要將各種方法聯合使用。最常用的純化方法有根據溶解度特性的沉淀法;根據電荷極性的離子交換層析、等電點聚焦電泳等;根據大小或重量的離心分離、透析、超濾等;根據親和部位的親和層析、共價層析等[2]。

酶的固定化技術

酶的化學本質是蛋白質,其最大的缺點是不穩定性,對酸、堿、熱及有機溶液容易發生酶蛋白的變性作用,從而降低或失去活性。而且酶往往在溶液中進行反應,反應以后會殘留在溶液系統中不易回收,造成最終產品分離提純操作上的麻煩。加之酶反應只能分批進行,難于連續化、自動化操作,這大大地阻礙了酶工程的發展應用，為克服上述缺點,需要將游離酶固定化后再進行應用。

酶的固定化技術是把從生物體內提取出來的酶,用人工方法固定在載體上，這是是酶工程的核心,它使酶工程提高到一個新水平。自從1969年世界上第一次使用固相酶技術以來，至今已有40多年的歷史。由于固定化酶的運動被化學或物理的方法限制了,能將其從反應介質中回收,所以原則上能在批量操作或連續操作中重復使用酶。

固定化酶具有如下性質:酶的穩定性提高;最適pH值改變;酶的活性和催化底物有所變化;最適溫度有所提高，對抑制劑和蛋白酶的敏感性降低;反應完成后可通過簡單的方法回收,且酶活力降低不多,這樣可使酶重復使用[3]。同時由于酶沒有游離到產品中,便于產品的分離和純化;實現批量或連續操作模型的可能,可進行于產業化、連續化、自動化生產。