上海月旭提供全套雙酚A檢測方法

　　根據衛生部辦公廳《關于征求禁止雙酚A用于嬰幼兒食品用容器公告意見的函》，擬自2011年6月1日起，禁止雙酚A用于嬰幼兒食品容器生產和進口；自2011年9月1日起，禁止銷售含雙酚A的嬰幼兒食品容器。

　　雙酚A危害：誘發性早熟或致癌

　　雙酚A，也稱BPA，是一種廣泛應用于塑料制造的化學物質，主要用于生產聚碳酸酯（PC）、環氧樹脂等多種高分子材料，被廣泛用于生產化工產品和食品相關產品，如嬰兒奶瓶、餐具、微波爐器皿、食品包裝容器的涂層、飲料瓶以及供水管道等。研究顯示，雙酚A是一類具有雌激素樣活性的內分泌干擾物，可能誘發兒童性早熟或致癌。

　　自2011年3月1日起，歐盟成員國禁止使用含雙酚A的塑料生產嬰兒奶瓶，并從6月1日起禁止進口此類塑料嬰兒奶瓶。針對雙酚A安全性問題，特別是對嬰幼兒健康的影響，衛生部已將嬰兒配方食品罐裝容器和塑料奶嘴中雙酚A列入2011年國家食品安全風險監測計劃。

　　上海月旭提供全套雙酚A檢測方法

　　目前，國內對雙酚A檢測方法有高效液相色譜紫外檢測器法、高效液相色譜熒光檢測器法、高效液相色譜二級陣列管檢測器法、高效液相色譜-串聯質譜法。但是，有關資料表明：食品接觸材料中雙酚A含量的檢測被忽視，無明確的檢測方案，如近期的“含雙酚A的嬰兒奶瓶”事件。上海月旭在多次的實驗和研究后，建立了測定塑紙杯、奶瓶等食品接觸材料中雙酚Ａ含量的高效液相色譜法。

　　1 實驗部分

　　1.1 試劑：

　　甲醇：色譜純（美國TEDIA試劑公司）

　　乙酸、無水乙醇：分析純

　　水：超純水（符合實驗室一級用水）

　　雙酚A標準物質：純度＞99.0%（美國Accustandard 公司）

　　1.2 儀器與設備：

　　LC310高效液相色譜儀（江蘇天瑞儀器股份有限公司）

　　DAD二極管陣列檢測器（德國諾爾有限公司）

　　電子天平（賽多利斯科學儀器（北京）有限公司）

　　超聲波清洗器（張家港市神科超聲電子有限公司）

　　超純水機（南京易普易達科學發展有限公司）

　　恒溫水浴鍋（金壇市杰瑞爾電器有限公司）

　　1.3 分析條件：

　　色譜柱：XB-C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)，月旭材料科技（上海）有限公司

　　流動相：甲醇+水=75+25

　　流速：0.7mL／min

　　柱溫：30℃

　　檢測波長：224nm

　　進樣量：10μl

　　1.4 標準溶液的配置

　　雙酚A標準儲備液：稱取適量的雙酚A標準物質，用甲醇稀釋，配置成濃度為1000μg/ml的雙酚A儲備液。

　　雙酚A標準供試液：使用時用3%乙酸溶液稀釋成濃度為1.0μg/ml的溶液，色譜圖如圖1所示。

　　1.5樣品前處理

　　稱取5g的樣品，將其剪成5×5mm的小碎片，置于250ml的三角燒瓶中，加入100mL的甲醇，50℃下超聲提取2小時，過濾至250mL雞心瓶，旋轉蒸發至干，用5mL水漩渦洗脫，待凈化。

　　1.6 樣品濃縮和凈化

　　SPE固相萃取小柱：C18E,500mg/3mL(part#：WSS4618E0350)

　　活化、平衡：10 mL甲醇，10 mL水依次過柱；

　　上樣：在水到達小柱上層篩板時，加入待凈化液；

　　淋洗：6 mL水合10 mL 30%甲醇水溶液依次淋洗小柱，流出液棄去；

　　洗脫：6 mL 50%乙腈水溶液洗脫，收集洗脫液。

　　洗脫液50℃下氮氣至近干，1 mL流動相溶解，進樣分析。

　　*可不過膜，過膜的話請選擇玻璃纖維膜，如果使用Nylon 或其它有機濾膜，會導致目標化合物被吸附。

　　2 結果與討論

　　2.1 色譜條件優化選擇

　　2.1.1流動相比例的選擇

　　由上述參考文獻可初步將流動相定為甲醇與超純水，從實驗結果可知：當只針對標準物質的測試時，使用純甲醇做流動相對雙酚A的響應效果最好，在檢測樣品含量時，我們可發現，以純甲醇作為流動相將會產生大量的溶劑峰，影響到樣品檢測結果，因此我們適當的添加一定比例的水，降低流動相的洗脫能力，以避開溶劑峰的影響。由于3%的乙酸溶劑峰較大，因此將甲醇：水=75：25的流動相作為最佳流動相，其中可根據不同樣品的性質我們也可靈活利用色譜條件。

　　2.1.2 波長的選擇

　　經過二級陣列管檢測器全波段掃描可知：雙酚A在200nm至400nm波長范圍內有三個最大吸收峰，分別為200nm、224nm、280nm，由于考慮到流動相的影響，200nm在流動相甲醇的截至波長（210nm）內因此不予考慮，而雙酚A在224nm處的響應度比在280nm處的響應度高，因此將最佳波長選定為224nm。

　　2.2 陰性和系統適用性試驗

　　不加入樣品，加入試劑，按樣品處理方法進行測定，在組分相應保留時間處沒有吸收；適當的更改色譜條件中的流速、流動相比例、色譜柱品牌檢測，均能符合相應的參數條件；其中取標樣10μl進樣檢測，雙酚A的理論板數大于7000。

　　2.3 精密度和重現性實驗

　　取雙酚A標準供試液，聯系進樣6針，每次10ul，進行測定，考察該組分精密度及重現性的相對標準偏差，精密度相對標準偏差為0.49%，重現性相對標準偏差為0.095%。

　　2.4 線性關系和檢測限

　　在本方法確定的色譜條件下，雙酚A濃度為0.1008ug/ml-1008.2ug/ml范圍內，線性關系良好，其峰面積-濃度的線性方程為：y = 10.537x+14.293，相關系數R2=0.9999；在 S/N =3的條件下，本方法最低檢測限為0.038mg/kg。

　　2.5 回收率試驗

　　采用在實際樣品中加入不同添加水平的雙酚A標準溶液的方式進行回收率實驗，按前處理方法處理后分析，采用外標法定量，每個添加水平單獨測3次，實驗結果表明，其平均回收率為85.78%～98.12%，RSD為397％～6.63％。

　　2.6 實際樣品的測試

　　采用此方法對部分食品接觸材料中雙酚A含量的檢測結果如下如表1所示。