1． 樣品處理：
① 取50UL被檢血清/血漿，加入試劑A200ul，試劑B50ul，用混勻器充分混勻到無顆粒狀態。
② 14000rpm離心5分鐘。
③ 取出上清80-100ul，加入等體積試劑C，混勻，14000rpm離心10分鐘。
④ 輕輕將液體全部倒掉，在濾紙上沾干殘留部分。
⑤ 加入200-400ul 75%預冷酒精，顛倒混勻，14000rpm離心5分鐘。
⑥ 輕輕倒掉液體，在濾紙上沾干殘留部分，最后65℃烘箱烘干或94℃快速烘干備用。
2． 反轉錄及PCR擴增
① 反轉錄
取 PCR Mix Ⅰ 28ul/人份×人份數
加入 RT-Enzyme Mix 2ul/人份×人份數
混勻后，取30ul分別加于每個已制備好的樣品管中（每人份用一個槍頭）滴加兩滴液體石蠟，離心數秒，37℃保溫30分鐘，進行反轉錄反應。
② 第一次PCR循環：反轉錄結束后直接按下列參數進行PCR循環。
預變性 94℃ 300秒 94℃ 300秒
94 ℃ 45秒 94℃ 30秒
50℃ 45秒 50℃ 30秒
72℃ 45秒 共30Cycles 72℃ 30秒 共30 Cycles
終延伸 72℃ 300秒 72 ℃ 300秒
水浴式擴增儀 單槽式擴增儀
③ 第二次PCR循環
取 PCR Mix Ⅱ 22.5ul/人份×人份數
加入 Taq DNA聚合酶 0.5ul/人份×人份數
混勻后，取23ul分別加于每個離心管中滴加兩滴液體石蠟,再取第一次循環后的產物2ul,分別加于各管中,離心數秒,按下列參數進行第二次擴增.
預變性 94℃ 300秒 94 ℃ 300秒
94 ℃ 45秒 94℃ 30秒
55℃ 45秒 55 ℃ 30秒
72℃ 45秒 共30Cycles 72℃ 30秒 共30 Cycles
終延伸 72℃ 300秒 72℃ 300秒
水浴式擴增儀 單槽式擴增儀
結果判斷
① 將50×TAE電泳緩沖液20ml加雙蒸水稀釋至1000ml（1×TAE）待用，取50
ml
1×TAE緩沖液于三角瓶中，加入一支瓊脂糖（加入少許雙蒸水，以防止加熱過程中水分蒸發而改變瓊脂糖膠的濃度），加熱使之溶解至清亮狀。待瓊脂糖涼至50℃左右時，倒入事先準備好的電泳平板上。
② 取15ul第二次擴增產物加樣于制備好的瓊脂糖凝膠上，在1×TAE緩沖液中80-100V電泳15-20分鐘，紫外燈下觀察結果。在302nm紫外燈下被溴化乙錠染色的DNA呈紅橙色熒光。樣品出現和陽性對照在同一水平位置上的紅橙色熒光帶即為陽性，否則為陰性。