丙酮酸脫氫酶（硫辛酰胺）的測定實驗

酶樣品

Tris-HCl MgCl2 丙酮酸 二磷酸硫胺 K3［Fe（CN）6］

分光光度計

實驗所需「試劑」具體見「其他」

0.98 ml 實驗混合物

0.02 ml 酶樣品

30 ℃ 時吸收值于 436 nm 處下降，吸收系數 ε₄₃₆＝755 l/（mol·cm）。

試劑：

0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.6

0.1 mol/L MgCl₂（MgCl₂·6H₂O，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L 丙酮酸（丙酮酸鈉，Mr＝110.0；110 mg 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L 二磷酸硫胺（ThDP，脫羧輔酶，Mr＝460.8；46.1 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L K₃［Fe（CN）₆］（Mr＝329.2；330 mg 溶于 10 ml 水中）