取本品約25mg，精密稱定，置25ml量瓶中，以甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取該溶液與內標溶液各5ml，置25ml量瓶中，以甲醇稀釋至刻度，搖勻，取5μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取黃體酮對照品適量，同法測定。按內標法以峰面積計算，即得。
本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集434圖）一致。取本品約5mg，置小試管中，加甲醇0.2ml溶解后，加亞硝基鐵氰化鈉的細粉約3mg、碳酸鈉及醋酸銨各約50mg，搖勻，放置10～30分鐘，應顯藍紫色。取本品約0.5mg，置小試管中，加異煙肼約1mg與甲醇1ml溶解后，加稀鹽酸1滴，即顯黃色。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇－水(65:35)為流動相；檢測波長為254nm。
理論板數按黃體酮峰計算應不低于1000，黃體酮峰和內標物質峰的分離度應符合要求。內標溶液的制備取己烯雌酚約25mg，精密稱定，置25ml量瓶中，以甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
方法名稱： 丙酸睪酮原料藥－丙酸睪酮－高效液相色譜法
應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定丙酸睪酮原料藥中丙酸睪酮的含量。
本方法適用于丙酸睪酮原料藥。
方法原理： 供試品經甲醇定量稀釋并加入內標后，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長241nm處檢測丙酸睪酮的峰面積，計算出其含量。
試劑： 甲醇
儀器設備： 1. 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數按丙酸睪酮峰計算應不低于1000。
1.3 紫外吸收檢測器
2. 色譜條件
2.1 流動相：甲醇 水=80 20
2.2 檢測波長：241nm
2.3 柱溫：室溫
試樣制備： 1. 內標溶液的制備
精密稱取苯丙酸諾龍，用甲醇制成每1mL中含1.6mg的溶液，即為內標溶液。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取丙酸睪酮對照品約25mg，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液與內標溶液各5mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。
3. 供試品溶液的制備
精密稱取供試品約25mg，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液與內標溶液各5mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。
注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長240nm處測定丙酸睪酮（C22H32O3）的峰面積，計算出其含量。
參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業出版社，2005版，一部，p.81。