鑒別
(1)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。(2)本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集176圖)一致。
檢查
酸度取本品3%的混懸液,依法測定(通則0631),pH值應為4.0~6.0有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定。臨用新制。溶劑N,N-二甲基甲酰胺-水(1:1)供試品溶液取本品適量,精密稱定,置棕色量瓶中,加N-二甲基甲酰胺溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.8mg的溶液,精密量取適量,用溶劑定量稀釋制成每1ml中約含80g的溶液。對照品溶液取兩性霉素B對照品適量,精密稱定,置棕色量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.8mg的溶液,精密量取適量,用溶劑定量稀釋制成每1ml中約含0.84g的溶液。系統適用性溶液取兩性霉素B約8mg,置50ml棕色量瓶中,加N,N-二甲基甲酰胺5ml使溶解,用甲醇稀釋至刻度,加鹽酸0.1ml,搖勻,放置1小時,取5ml,置10ml量瓶中用水稀釋至刻度,搖勻。靈敏度溶液精密量取對照品溶液適量,用溶劑定量稀釋制成每1ml中約含0.08g的溶液色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6mm×250mm,5μm或效能相當的色譜柱);以乙腈磷酸溶液(pH1.00±0.05)(300:700)為流動相A,以乙腈-磷酸溶液(pF1.00±0.05)(500:500)為流動相B,按下表進行線性梯度洗脫;流速為每分鐘0.8ml;柱溫為25℃;檢測波長為303nm和383nm;進樣體積1001l時間(分鐘)流動相A(%流動相B(%)060系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖(383nm)中,必要時調整流動相的比例使兩性霉素B的保留時間在25~30分鐘之間,雜質C峰與雜質B峰間的分離度應符合要求靈敏度溶液色譜圖(383nm)中,主成分色譜峰高的信噪比應大于10。測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖限度供試品溶液色譜圖(303nm)中如有雜質峰,雜質A(相對保留時間約為0.75)峰面積不得大于兩性霉素B峰面積的0.5倍(2.0%)(供注射用),雜質A峰面積不得大于兩性霉素B峰面積的1.25倍(5.0%)(供非注射用),其他單個雜質峰面積不得大于兩性霉素B峰面積的0.25倍(1.0%),小于兩性霉素B峰面積的0.025倍的峰忽略不計(0.1%);供試品溶液色譜圖(383nm)中如有雜質峰,按外標法以對照品溶液主峰面積計算,雜質B與雜質D之和不得過4.0%,其他單個雜質峰不得過2.0%,小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計。303nm處與383nm處檢測的雜質總量不得過15.0%。干燥失重取本品,以五氧化二磷為干燥劑,在60℃減壓干燥至恒重,減失重量不得過5.0%(通則0831)。