一、原理：細胞內堿性磷酸酶能分解磷酸萘酚AS-BI為磷酸和芳基萘酰胺，后者與重氮鹽（固蘭BB）偶聯，形成不溶性的蘭色沉淀物。
二、結果判定：
正常血細胞的染色反應
堿性磷酸酶主要存在于中性粒細胞，除巨噬細胞可呈陽性反應外，其他血細胞均呈陰性反應。結果應根據成熟中性粒細胞胞漿內蘭色顆粒所占胞漿面積，顆粒大小，顆粒多少及染色強度來判斷，陰性為胞漿內無蘭色顆粒。
1、分級標準：
|
級別 |
蘭色顆粒占胞漿面積（%） |
顆粒大小 |
顆粒多少 |
染色強度 |
|
+ |
＜50 |
小小 |
很少 |
微弱-中等 |
|
++ |
50-80 |
小-中等 |
少等-中等 |
中等-強 |
|
+++ |
80-100 |
中等-大 |
中等-多 |
強 |
|
++++ |
100 |
中等和大 |
很多（密集、甚至覆于核上） |
很強 |
2、量的表示：陽性率（%）、積分
3、正常值：正常人一般陽性率＜40%，以“+”陽性反應為主，陽性積分40-100。
判定結果時，在油鏡下，計數100個成熟的中性粒細胞（包括中性分葉核粒細胞和中性桿狀核粒細胞），計算陽性率。分為+~++++，+為1分，++為2分，依次類推，分數乘以各自細胞數，即為總積分。如：+ 10個，++13個，+++5個，++++2個，則積分為1*10+13*2+5*3+4*2=59分。分級時主要根據染色強弱度來判定。
三、臨床意義：NAP染色主要用于
1．鑒別慢粒及中性粒細胞類白血病反應，前者陽性率及積分值均極低，甚至為零。而后者呈強陽性反應，可達成100％，積分值可達400。
2．初步鑒別急性白血病類型，急淋時NAP活性多增強，急粒時不增強。
3．初步鑒別感染的病原體，在急性細菌性感染時NAP陽性反應強，而病毒和寄生蟲及結核菌感染時NAP染色結果多在正常范圍
（一）生理變化：
（1）年齡變化：新生兒NAP活性增高，以后下降。兒童期各年齡大致相似，成年期較兒童期活性減低，老年期更低。
（2）應激狀態下的變化：緊張、恐懼、激烈運動等NAP活性可增高。
（3）月經周期中的變化：經前期增高，行經后降低，經后期恢復。
（4）妊娠期的變化：妊娠期2~3個月的NAP積分值輕度增高，以后逐月增高，分娩時達高峰，產后則恢復正常。
（二）病理性變化：
（1） 感染：細菌性感染時，NAP活性顯著增高，而球菌感染又比桿菌感染時高。病毒性感染時，NAP活性常無明顯變化。因此本法可幫助鑒別細菌性與病毒性感染。
（2） 血液病：
?慢性粒細胞性白血病時，NAP活性顯著降低或為陰性，常為“0”，治療后病情緩解時，NAP活性恢復正常，急變時NAP活性增高。類白血病反應時，NAP活性明顯增高，中性桿狀核粒細胞的堿性磷酸酶活性增高，甚至中性晚幼粒細胞也呈陽性反應。因此本法常用來鑒別慢粒和類白血病反應及觀察慢粒療效的指標之一。
?急性粒細胞性白血病時，NAP活性減低。急性淋巴細胞性白血病時，NAP活性增高。因此本法可作為鑒別急粒和急淋的方法之一。
?急性單核細胞白血病時NAP積分值一般減低，有時可正常。
?粒細胞白血病合并細菌性感染時NAP積分值可增高，但不如單純性細菌性感染增高明顯。
?再生障礙性貧血時，NAP活性增高。陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥時，NAP活性減低。因此本法可作為鑒別陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥和再生障礙性貧血的方法之一。
?真性紅細胞增多癥時，NAP活性增高。繼發性紅細胞增多癥時，NAP活性無明顯變化。因此本法可用來鑒別真性紅細胞增多癥和繼發性紅細胞增多癥。
?骨髓增生異常綜合癥的NAP積分值減低。
2、量的表示：陽性率（%）、積分
3、正常值：正常人一般陽性率＜40%，以“+”陽性反應為主，陽性積分40-100。
判定結果時，在油鏡下，計數100個成熟的中性粒細胞（包括中性分葉核粒細胞和中性桿狀核粒細胞），計算陽性率。分為+~++++，+為1分，++為2分，依次類推，分數乘以各自細胞數，即為總積分。如：+ 10個，++13個，+++5個，++++2個，則積分為1*10+13*2+5*3+4*2=59分。分級時主要根據染色強弱度來判定。
三、臨床意義：NAP染色主要用于
1． 鑒別慢粒及中性粒細胞類白血病反應，前者陽性率及積分值均極低，甚至為零。而后者呈強陽性反應，可達成100％，積分值可達400。
2． 初步鑒別急性白血病類型，急淋時NAP活性多增強，急粒時不增強。
3．初步鑒別感染的病原體，在急性細菌性感染時NAP陽性反應強，而病毒和寄生蟲及結核菌感染時NAP染色結果多在正常范圍
（一）生理變化：
（1）年齡變化：新生兒NAP活性增高，以后下降。兒童期各年齡大致相似，成年期較兒童期活性減低，老年期更低。
（2）應激狀態下的變化：緊張、恐懼、激烈運動等NAP活性可增高。
（3）月經周期中的變化：經前期增高，行經后降低，經后期恢復。
（4）妊娠期的變化：妊娠期2~3個月的NAP積分值輕度增高，以后逐月增高，分娩時達高峰，產后則恢復正常。
（二）病理性變化：
（1） 感染：細菌性感染時，NAP活性顯著增高，而球菌感染又比桿菌感染時高。病毒性感染時，NAP活性常無明顯變化。因此本法可幫助鑒別細菌性與病毒性感染。
（2） 血液病：
慢性粒細胞性白血病時，NAP活性顯著降低或為陰性，常為“0”，治療后病情緩解時，NAP活性恢復正常，急變時NAP活性增高。類白血病反應時，NAP活性明顯增高，中性桿狀核粒細胞的堿性磷酸酶活性增高，甚至中性晚幼粒細胞也呈陽性反應。因此本法常用來鑒別慢粒和類白血病反應及觀察慢粒療效的指標之一。
急性粒細胞性白血病時，NAP活性減低。急性淋巴細胞性白血病時，NAP活性增高。因此本法可作為鑒別急粒和急淋的方法之一。
急性單核細胞白血病時NAP積分值一般減低，有時可正常。
粒細胞白血病合并細菌性感染時NAP積分值可增高，但不如單純性細菌性感染增高明顯。
再生障礙性貧血時，NAP活性增高。陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥時，NAP活性減低。因此本法可作為鑒別陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥和再生障礙性貧血的方法之一。
真性紅細胞增多癥時，NAP活性增高。繼發性紅細胞增多癥時，NAP活性無明顯變化。因此本法可用來鑒別真性紅細胞增多癥和繼發性紅細胞增多癥。
骨髓增生異常綜合癥的NAP積分值減低。