臨床化學檢查方法介紹血紅蛋白電泳

血紅蛋白電泳介紹：

　　各種血紅蛋白的等電點不同的特點，在一定pH緩沖液中所帶的正、負電荷不同，經電泳后各血紅蛋白的移動方向不同。

血紅蛋白電泳正常值：

　　電泳法： HbA95%、HbA21.1%-3.2%、HbA32%-3%。
　　Singer法：HbF<4%。

血紅蛋白電泳臨床意義：

　　(1) HbA₂升高，可見于維生素B12或葉酸缺乏所致的巨細胞貧血、部分輕型珠蛋白生成障礙性貧血。
　　(2) HbA₂降低：見于缺鐵性貧血。
　　(3) HbF升高：可見于純合子β珠蛋白生成障礙性貧血、雜合子β珠蛋白生成障礙性貧血和正常新生兒。
　　(4) 其他：
　　① 主要成分為HbS，而無HbB，可見于鐮形細胞血紅蛋白病。
　　② HbS、HbF和HbA₂輕度增加，而HbA極少或消失，結合調查可診斷為HbS-β-海洋性貧血，多見于地中海地區。
　　③ 除HbS外，含有10%-30%HbA和輕度增高的HbF及HbA₂，也可考慮HbS-β-海洋性貧血。
　　④ HbS占20%-30%，HbA占65%-75%，并含有正常的HbF和HbA₂，可診斷為HbS-α-海洋性貧血。
　　⑥ HbA消失，HbC占總血紅蛋白的28%-44%，可診斷為血紅蛋白病，多見于黑人，血片中可見較多的靶形細胞。
　　⑦ 有HbS，還出現HbD，血片中有靶形細胞，可診斷為血紅蛋白D病，我國北方較多見。
　　⑧ 電泳結果出現HbE，可診斷為血紅蛋白E病，主要見于東南亞、印度等，我國以廣東南部多見。

血紅蛋白電泳注意事項：

　　蠟酸纖維薄膜電泳直接比色法
　　試劑：同醋酸纖維素膜微量血紅蛋白電泳。
　　操作：
　　(1)將醋酸纖維素膜作1/3切開(4cm×8cm)漫于TEB緩沖液中，10min以上。
　　(2)取出醋酸纖維素膜用濾紙吸去多余的水份。以Hb吸管吸取100g/L溶血液10μl均勻涂于玻璃推片下緣，在距薄膜陰極端1.5-2.0cm處于無光澤面點樣。每個標本同時做兩份。
　　(3)電泳：緩沖液同微量血紅蛋白電泳。電壓180V，時間40min-1h。(以各區帶明顯分開為宣)電泳后交換電極，緩沖液可反復使用。
　　(4)洗脫與定量 分別剪下HbA,HbA₂和相當于HbA₂大小的對照區帶。如有異常Hb區帶(HbX)也同時剪下，各自放在相應的試管中。于HbA管中加TEB緩沖液10ml，其余各管加TEB緩沖液2ml，浸泡30min，時時振搖。待完全洗脫后。將
　　洗脫液混勻，用721分光光度計，波長413nm。以空白調零，測各管吸光度。
　　(5)計算：
　　如有異常HbX，則計算HbA₂%時，分母中還要加：HbX吸光度。
　　
 
　　HbX%=
 

血紅蛋白電泳檢查過程：

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