肉渣培養基
成份: 牛肉渣 牛肉浸液(牛肉膏)
制法:將做牛肉浸液的牛肉渣,裝入試管,高約3毫米,加入牛肉浸液或牛肉膏湯(PH7.6)約5毫升,比肉渣高一倍,液面上加入已溶解的凡士林,高約0.5厘米(不加也可),121℃高壓滅菌20-30分鐘后保存于冰箱內備用 。
用途:用于厭氧菌培養。
注意:如無肉渣也可用牛、羊血等代替,將血塊先放入水內煮沸,取出成小塊,血塊在加熱后搖勻成碎顆粒狀。
單糖發酵管培養基(半固體)
成份: PH7.6-7.8蛋白胨水 1000毫升(0.3克/100毫升)
1.2%酚紅液 0.4毫升
瓊脂 0.4 - 0.5克
10%糖或醇 10毫升
制備:把蛋白胨水,瓊脂加熱溶解,然后加1.2%酚紅液0.4毫升,10%糖10毫升,混勻,分裝試管,每管約2-3毫升,經115℃高壓滅菌20分鐘后,分置于試管架上,貼上各類糖或醇類標簽備用。
質控標準:細菌發酵糖類或醇而產生酸,能使培養基PH改變,指示劑由紅變黃色,如因發酵產生氣體則
半固體內產生氣泡,如有動力則半固體由清亮變混濁。
明膠培養基
成份:肉浸液 1000毫升(牛肉浸膏5克)
明膠 12克
制法:
100毫升肉浸液中,加入明膠12克,隔水加熱煮化,校正PH7.2,分裝小號試管,用阿諾氏間歇滅菌80℃30分鐘,連續3日,或者108℃高壓20分鐘,冷卻,貯存備用。
堿性蛋白胨水
成份:
蛋白胨 20克 氯化鈉 5克
硝酸鉀 0.1克 結晶碳酸鈉(NaclCO3.12H2O) 0.2克
水 1000毫升
制法:將蛋白胨,Nacl,硝酸鉀,結晶碳酸鈉稱好,溶于1000DW中,校正PH8.4分裝試管,121℃高壓
滅菌15分鐘后備用 。
用途:用于霍亂弧菌培養。
葡萄糖蛋白胨水(M。V用)
成份:蛋白胨 5克 葡萄糖 5克
K2HPO4 5克 水 1000毫升
制法:將上述稱好溶解分裝試管,調PH7.4高壓滅菌115℃ 滅菌20分鐘 ,或者葡萄糖加熱煮沸后再倒試管
標準:滅菌試驗合格。
接種大腸桿菌VP陰性,M陽性;接種產氣桿菌VP陽性,M陰性。
用途:作鑒別腸道桿菌用。
枸椽酸鹽培養基
成份:磷酸二氫銨 0.1克 硫酸鎂 0.02克
磷酸氫二鉀 0.1克 枸椽酸鈉 0.23--0.5克(0.36)
氯化鈉 0.5克 瓊脂 1.5克
0.5%溴麝香草酚蘭2毫升 (調PH6.8再加)
制法:將上述稱好,放入水中煮沸溶解,調PH6.8,然后分裝中號試管,高壓滅菌,趁熱倒呈斜面,凝固
后備用。
標準:1滅菌試驗合格,培養基呈果綠色適宜。
2接種大腸桿菌,培養基上不生長,也不變色。
3接種產氣桿菌,培養基呈深蘭色。
用途:作鑒別大腸桿菌用。
雙糖鐵培養基
成份:
下層:蛋白胨 1克 氯化鈉 0.5克
葡萄糖 0.2克 瓊脂 0.3-0.5克
水 100毫升
將上述物質混勻調PH7.6后加1.2%酚紅0.4毫升
上層:蛋白胨 1克 氯化鈉 0.5克
乳糖 1克 硫代硫酸鈉 0.03克
硫酸亞鐵 0.02克 瓊脂 1克
水 100毫升
制法: 1將下層配好,分裝中號試管(1毫升),塞好包扎,15磅高壓滅菌半小時,使凝固后備用。
2制上層時,先將蛋白胨水制好,加入硫酸亞鐵,硫代硫酸鈉,加熱溶解PH8.1,再加入酚紅分瓶,(每瓶300毫升,稱取瓊脂包扎滅菌,趁熱加入乳糖隔水煮沸30分鐘或112℃消毒15分鐘)。
3取已制的下層管,每管用無菌法倒入上層液約1。5毫升,邊斜放置使成斜面,凝固后備用。
標準:無菌試驗合格,接種大腸桿菌下層產酸產氣,上層產酸。
尿素培養基
成份:蛋白胨 0.1克 氯化鈉 0.5克
磷酸二氫鉀 0.2克 尿素 0.2克(或10%2毫升)
葡萄糖 0.01克(或10%葡萄糖0.1毫升)
H2O 100毫升 酚紅(0.2%) 0.4毫升
制法:1除葡萄糖,尿素外把其它藥品稱好放入水中煮沸,使溶解,調PH7.2過濾,15磅高壓滅菌15分鐘.
2配制尿素(滅菌)液:每100毫升基液內加2毫升.
3配制10%葡萄糖(滅菌)每100毫升加0.1毫升.
4分裝小試管待用.
標準:
1滅菌試驗合格.
2接種變形桿菌24小時呈紅色.
用途:鑒定變形桿菌用.
膽鹽中性紅瓊脂
成份:蛋白胨瓊脂PH7.2-7.4 5000毫升
膽 鹽 2.5克
乳糖 5.0克
對氨基苯甲酸 25毫克
1%中性紅溶液 25毫升
制法:
將膽鹽,對氨基苯甲酸,乳糖趁熱加入已滅菌之蛋白胨瓊脂中,待冷至50-60℃時,加入1%中性紅液2.5毫升,混合后即傾注平皿,凝固待用.
*:1%中性紅:1克中性紅加酒精60毫升,加水40毫升
丙二酸鹽培養基(縮蘋果酸鈉)
成份:丙二酸鈉 0.3克 酵母浸膏 0.1克
Nacl 0.2克 硫酸銨 0.2克
K2HPO4 0.06克 KH2PO4 0.04克
水 100毫升
PH6.8,高壓滅菌備用.
0.2%溴麝香酚蘭乙醇 1.25毫升
制法:與枸椽酸鹽利用試驗相類似,是測定細菌能否利用丙二酸鹽與碳源.無機銨鹽為氨源而生長,生長者使培養基變成堿呈蘭色.
鑒定: 克氏桿菌 (+) 赫夫尼亞 (+)
沙門氏菌 (—) 痢疾桿菌 (—)
苯丙氨酸培養基
成份:酵母浸液 1.5克 DL--苯丙氨酸 1克
磷酸氫二鈉(無水)0.5克(或L-苯丙氨酸 0.5克)
氯化鈉 2.5克 瓊脂 6克
水 500毫升 PH7.4
制法:1 將上述成份加熱溶解,分裝于12*125mm口徑的試管中,每管約4毫升.
2 高壓滅菌15磅10分鐘,趁熱使試管斜置凝固后備用.
3 接種時劃斜面.
用途:鑒定沙門氏菌用.苯丙氨酸脫氨酶試驗沙門氏菌陰性.
雙抗培養基
成份:
蛋白胨 10克 牛肉膏 5克
氯化鈉 5克 無水亞硫酸鈉 3克
檸檬酸鈉 10克 蔗糖 10克
瓊脂粉 20克 水 1000毫升
制法:
1將上物稱好,加熱溶于水中.
2調PH8.2—8.4
3 分裝高壓滅菌后備用.
傾注平板前先加熱溶解瓊脂等冷至50℃左右,按無菌操作加入多、慶抗菌素充分搖勻, 傾注平板,凝固后備用.
(慶大霉素:150u/毫升,多粘菌素:1500u/毫升, 2毫升加至1000毫升培養基內,此相當于慶大霉素0.3u/毫升, 多粘菌素3u/毫升)
O2培養基
保存液:(文—臘氏液)
A液:硼酸 12.405克 KCL 14.912克
水 1000毫升
取A液250毫升 0.8%NAOH 133.5毫升
NACL 20克 水 1000毫升
分裝高壓滅菌.
硝酸鹽胨水
成份:
蛋白胨 1克
硝酸鉀(無NO2) 0.1克
H2O 100毫升
PH7.4,高壓滅菌分裝備用.
(如無硝酸鉀也可用硝酸鈉0.02克,NACL0.05克,H2O100毫升)
用途:硝酸鹽還原試驗用.
原理:測定細菌能否還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,后者在酸性條件下與a—萘胺和對氨基苯磺酸發生重氮反應,生成紅色的1-萘-4偶氮苯對磺酸.
制法:試劑甲液A對氨基苯磺酸0.8克溶于5N的醋酸100毫升.
B:乙液a-萘酚0.5克溶于5N的醋酸100毫升中
將細菌接種于硝酸鹽水中37℃培養24--96小時,加入甲液0.1毫升,再加入乙液數滴,立即呈現紅或紫色為陽性
king氏培養基(能促進綠膿菌綠色素產生)
成分:
蛋白胨 2克 K2SO4 1克
甘油 1克 MGCL2 0.14克
瓊脂 1.5克 H2O 100毫升
KING氏培養基(能促進綠膿菌熒光色產生)
成分:
蛋白胨 2克 甘油 1克
K2SO4 0.15克 MGSO4 4.7克 H2O 0.15克
瓊脂 1.5克 H2O 100毫升
調PH7.2 15磅20分鐘消毒后使成斜面備用.
七葉苷水解試驗
原理:
糞鏈球菌能分解七葉苷(Escalin)其代謝產物與鐵離子結合產生黑色沉淀,使培養基變黑.
方法:
將菌種接種在七葉苷或瓊脂上37℃18小時,觀察結果,培養基變黑色,其他鏈球菌能生長但不變黑色,肺炎鏈球菌不長.
成分:
七葉苷 0.1克 胰胨 1.5克
枸櫞酸鐵 0.2克 瓊脂 2.0克(0.5克/50毫升)
膽汁 2.5毫升 H2O 100毫升
PH7.0分裝小試管內高壓滅菌后備用(10磅20分鐘)
七葉苷又名桑樹皮甙,七葉靈,Aesclin Escnlim Bicolorin等.為白色針狀結晶.水溶液蘭色熒光.)