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  • 發布時間:2018-08-15 12:27 原文鏈接: 臨床檢驗中化學發光免疫分析的應用

      化學發光是一種常見的科學現象,利用化學發光現象可以進行免疫分析檢驗,這種技術在近年來得到了越來越廣泛的推廣。在此之前,臨床上主要采用免疫酶技術、免疫熒光技術以及放射免疫技術等進行臨床檢驗,這幾種檢驗方法各有優缺點,在臨床應用上均存在一定的缺陷。而隨著化學發光免疫分析技術的不斷發展,其在臨床檢驗中操作簡單、檢測速度快、靈敏度高、易于控制以及污染少等優點逐漸顯現出來,因此越來越受到了醫學界的青睞。我院近年來也在臨床檢驗中化學發光免疫分析的應用方面做出了許多臨床研究與實踐,并取得了一定的成果,現將我院自2012年3月至2014年3月期間內收治的兩組共100例乙肝患者納入臨床研究對象,分別利用化學發光免疫分析法和酶聯免疫吸附測定法檢驗其血樣中的乙型肝炎病毒核心抗體,對比分析兩種檢驗方法的陽性檢出率,報道如下: 
      1資料與方法 
      1.1 一般資料 
       用于臨床研究的100例乙肝患者是由我院自2012年3月至2014年3月期間內收治的,其中男性患者有52例、女性患者有48例,各占總數的52%、48%;年齡在20-75歲之間不等,平均年齡(47±3.6)歲;病程在5個月-23年之間不等,平均病程(8.72±2.13)年;所有患者均自愿提供血液樣本進行檢驗。 
      1.2 方法 
      1.2.1 儀器與試劑 
       儀器分別選用瑞士羅氏公司所生產的E601電化學發光全自動免疫分析儀和北京普朗公司所生產的DNM-9602A酶聯免疫檢測儀,試劑分別選用瑞士羅氏公司所生產的ECLIA檢驗試劑和沈陽惠民公司所生產的ELISA檢驗試劑。 
      1.2.2 檢驗方法 
       令100例患者清晨空腹,抽取其靜脈血液作為檢驗樣本,然后分別利用化學發光免疫分析法和酶聯免疫吸附測定法檢驗其血樣中的乙型肝炎病毒核心抗體。化學發光免疫分析法的操作步驟如下:①采用還原劑將待測血樣進行預處理;②在血樣標本中加入乙型肝炎核心抗原并進行恒溫培育,使其與血樣標本中的乙型肝炎病毒核心抗體形成抗原抗體復合物;③分別加入經生物素標記的乙型肝炎病毒核心抗體和經釕標記的乙型肝炎病毒核心抗體,使其與乙型肝炎核心抗原結合;④加入由鏈霉素包被的磁珠以形成固相復合物;⑤待電極表面吸附磁珠后使用三丙胺清洗液進行沖洗,從而令電極表面結合物發生發光反應;⑥根據檢出光信號來確定血樣標本中的乙型肝炎病毒核心抗體數量,光信號越強,則血樣標本中的乙型肝炎病毒核心抗體數量越少。酶聯免疫吸附測定法的操作步驟如下:①在血樣標本中加入經辣根過氧化物酶標記的乙型肝炎病毒核心抗體酶結合物并進行恒溫培育,使酶標抗體與血樣標本中的乙型肝炎病毒核心抗體經競爭結合微孔板上固相抗原的結合位點;②洗滌血樣標本后加入底物,從而令結合于固相的酶標抗體顯色;③根據結合于固相的酶標抗體數量來確定血樣標本中的乙型肝炎病毒核心抗體數量,結合于固相的酶標抗體數量越少,則血樣標本中的乙型肝炎病毒核心抗體數量越多。 
      1.3 統計學分析 
       對上述臨床研究中所記錄的數據皆利用SPSS 19.0統計學軟件進行統計,對所有計數資料均采取t檢驗,對計量資料均采取卡方檢驗,P<0.05則具有統計學意義。 
      2 結果 
       利用化學發光免疫分析法檢驗的乙型肝炎病毒核心抗體陽性檢出率為97%,利用酶聯免疫吸附測定法檢驗的乙型肝炎病毒核心抗體陽性檢出率為79%,兩組檢驗結果的數據比較差異具有統計學意義(P<0.05)。其詳細數據可見表1。 
      表1 兩種檢驗方法的檢驗結果對比表 
      3 討論 
       化學發光免疫分析是臨床上近年來所推廣使用的一種新型標記免疫檢驗技術,它具有操作簡單、檢測速度快、靈敏度高、易于控制以及污染少等優點。在應用學科上,化學發光免疫分析的一級學科為免疫學、二級學科為應用免疫、三級學科為免疫學檢測和診斷。化學發光免疫技術主要包括有兩個反應過程,即免疫反應過程和化學發光反應過程,其整個工作原理如下:首先在抗原或者抗體上面標記化學發光物質或其他發光的酶標記物,使其發生免疫反應,也即發生抗原和抗體的特異性結合,從而形成復合物,然后再在復合物中加入氧化劑或發光底物,使復合物發光,最后再根據經儀器檢測所得到的發光強度與待測物質的濃度所呈現的線性關系來達到濃度測定的目的。其中,能夠發生化學發光的物質大多都是有機化合物,而其發光反應也大多都是氧化反應,這主要是因為有機化合物的氧化反應能夠提供足夠的中間體,當這些中間體具有了較高的能量后,就能夠釋放光子發光。總體來說,化學發光免疫技術主要可以分為發光物免疫測定、發光酶免疫測定以及發光輔助因子免疫測定等幾種類型。 
      乙型肝炎病毒核心抗體是人體發生乙肝病毒感染后最易產生的檢測指標,它的臨床檢測率非常高,通常情況下,急性乙肝、慢性乙肝以及乙肝病毒攜帶者血樣中的高效價乙型肝炎病毒核心抗體陽性檢出率可高達90%以上。近年來,隨著臨床檢驗技術的不斷發展,化學發光免疫分析在乙肝患者乙型肝炎病毒核心抗體的檢測中也得到了越來越廣泛的應用,并取得了顯著的效果。 
       本文主要以乙肝患者血樣中乙型肝炎病毒核心抗體的檢驗為例來研究臨床檢驗中化學發光免疫分析的應用,并將其與酶聯免疫吸附測定法進行對比。本組所選取的100例乙肝患者均為自愿提供血液樣本進行檢驗。根據本次臨床研究結果顯示:利用化學發光免疫分析法檢驗的乙型肝炎病毒核心抗體陽性檢出率為97%,利用酶聯免疫吸附測定法檢驗的乙型肝炎病毒核心抗體陽性檢出率為79%,兩組檢驗結果的數據比較差異具有統計學意義(P<0.05)。因此可以得出結論:在臨床檢驗中利用化學發光免疫分析法進行檢驗能夠大大提高檢驗結果的準確性,從而為臨床診斷提供更加真實可靠的依據,值得廣大臨床檢驗醫師大力推廣與應用。 

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