臨床質譜論壇（二）：血藥濃度監測與微量物質檢測專題

　　分析測試百科網訊，2021年4月10日，北京第三屆臨床質譜論壇繼續進行。第二天的論壇由“血藥濃度監測主題”、“毒素/元素主題”和“蛋白定量主題”組成，嘉賓的精彩報告將現場氣氛繼續推向高潮。

北京華大吉比愛生物技術有限公司 蔣旭博士

華大吉比愛 自動化樣品前處理儀

　　會議開始，是華大吉比愛生物技術有限公司的新品發布會。華大吉比愛參加了人類蛋白組（HPP）計劃，且質譜平臺建成了包括高分辨質譜、飛行時間質譜、三重四極桿質譜等30余臺的700平米超潔凈檢測實驗室，形成強大的質譜檢測技術平臺，是串聯質譜行業標準制定單位，有多個質譜試劑盒產品獲證，同時得到了國際實驗室能力驗證ISO15189、通過CAP能力驗證評估；NCCL和DEQAS室間質評滿分通過。累計發表了80多篇研究論文，總影響因子達到了432；華大在本屆質譜論壇帶來的EX-48自動化樣品前處理儀，在設計上加以改進，新品體積更加小巧，性價比高，可節省實驗室空間及設備開支；操作簡便，自動化程度高，降低了人員培訓難度，避免人為操作失誤；處理速度快，減低人工操作時間，可同時處理8-48個樣本，高效快速；方法重復性好，性能優良，可靠性高等優點。

主旨報告

北京大學醫學部精準醫療多組學研究中心主任 黃超蘭

報告題目：從疾病機制到診療靶點—生物標志物驅動的精準醫學轉化

　　基因組學、代謝組學、蛋白質組學和轉錄組學為當今四大主流組學技術。針對蛋白質組學，質譜技術不僅能進行深度定性定量，對于復雜結構的蛋白質間相互作用、翻譯后修飾等也有足夠的優勢。黃超蘭通過利用基于質譜的蛋白質組學技術對生物標志物開發的舉例來分析如何能做到從實驗室連接到醫院，達到未來精準化診療。例如：絕對定量蛋白質組方法準確描繪TCR-CD3復合物酪氨酸動態磷酸化修飾全貌，揭示CD3e的單磷酸化及其新功能，推動免疫治療的升級換代；與中國疾控中心高福院士合作，深度尿液蛋白質組學揭示早期新冠病毒感染主要為免疫制劑，緊密連接破壞，大規模代謝紊亂，并或存在“兩階段”機制。目前正在驗證中的靶點有優良的結果并在轉化過程中。黃超蘭團隊與合作者研究成果入選2020年度“中國生命科學十大進展”以及“自然通訊”雜志的Top 50 Read Article of the Year。同時也還有多項臨床課題的研究在開展中。

北京大學心血管研究所副所長 鄭樂民

報告題目：脂代謝，菌群代謝與質譜診斷

　　鄭樂民近年一直從事與代謝相關的疾病研究，如膜聯蛋白A1通過促進糖尿病腎病炎癥反應的緩解減輕腎臟損傷的研究，并得到了膜聯蛋白A1可能是一種很有前途的治療糖尿病腎病的方法。促進內源性炎癥緩解可能是糖尿病腎病的有效治療方式的結論。此外還介紹了脂代謝與卒中研究、神經血管單元與神經元退行性疾病、衰老與代謝的關系等研究。進而舉例說明質譜法分析器官代謝組學、擬靶向代謝組學和代謝流組學分析的優勢：兼顧非靶向代謝組學的高覆蓋和靶向代謝組學定量的精準度，不需要復雜的feature detection和峰對齊運算，不需要標準品建立MRM離子對；適用于大隊列樣本的高通量發現到定量；目前已用于臨床多中心研究，易實現不同批次樣本數據校準及整合，研究所主要以三種四極桿質譜為主，在匹配臨床檢驗的同時降低設備購置成本。

血藥濃度監測主題報告

首都醫科大學附屬北京朝陽醫院藥事部副主任藥師 李鵬飛

報告題目：治療藥物監測及應用案例

　　藥物監測（TDM）發展至今，已聯合藥物基因組學、代謝組學，CYP基因分析多類藥物，同時運用多類型儀器，如HPLC-MS、紅外光譜質譜和毛細管電泳等。自2016年開始設立“精準醫學研究”重點專項，高地行動計劃工程等，中國科技部計劃2030年前投入600億元。

　　李鵬飛介紹，TDM需要借助試劑盒來完成，朝陽醫院普及質譜方法后，與以往方法相比，每年可節省試劑盒成本100余萬，如：他克莫司監測試劑盒產品是全國第2個獲批的LC-MS/MS試劑盒產品，也是SFDA批準的第1個他克莫司的LC-MS/MS法檢測試劑盒。此試劑盒檢測方法經過標準化，且測定值更加準確可靠，節省檢測時間和費用，可以滿足臨床準確測定的要求，更加適合臨床的使用和推廣。

首都醫科大學附屬北京安定醫院臨床檢驗科主任 李文標

報告題目：液相色譜串聯質譜技術在精神藥物TDM中的應用

　　治療藥物監測（TDM）是通過定量測定血液（或其他液體）中的藥物濃度，指導疾病藥物治療的一門交叉學科。經過幾十年的發展，TDM已經取得了豐碩成果，對指導臨床合理用藥發揮了重要作用。精神藥物指主要作用于中樞神經系統，并影響人類認知、情感和行為等精神活動的藥物，精神類藥物需長期用藥，且不良反應較多，個體差異明顯，起效時間長，療效不明確有隱匿性的中毒反應及血藥濃度與療效和副作用相關等問題。LC-MS/MS因具有高靈敏度（可達pg級）、高特異性、測試速度快，可同時檢測多種藥物及其代謝物，精密度較好的優勢，為目前TDM最佳測定方法，且最有前景的技術，未來完全可以取代化學發光發法。但應加大研發力度，經過嚴格的方法學驗證，取得IVD證書，且實現全自動化，才能適應臨床實驗室對于方法和儀器的要求，質量才能得到根本保障。

午餐衛星會

　　午餐衛星會分別由SCIEX（中國）的產品經理叢宇婷；島津企業管理（中國）的楊江濤；南京品生醫療科技有限公司的副總裁張偉；美康生物科技股份有限公司的金彬以及山東英盛生物技術有限公司的產品經理蘇波帶來精彩報告。

毒素/元素主題報告

美國加州大學舊金山分校臨床化學研究員 Ruben Luo

　　報告題目：Finding the “Silent Killers”-Mass Spectrometry for Identifying Natural Toxins

　　高分辨質譜通常用來對未知物進行識別，并通過天然毒素譜庫進行篩選。以天然毒素鑒定為例，患者曾因十二指腸潰瘍及穿孔引起大出血就診，經過常規檢查并未發現病因后，醫院決定LC-HR-MS/MS對血液進行未知物篩查，最終在血清發現可疑物，通過對藥物片劑的對比，鑒定出多種藥物成分：非甾體抗炎藥雙氯芬酸、吡羅西康和吲哚美辛，并最終認定非甾體抗炎藥為罪魁禍首。Ruben Luo還分享了高分辨質譜用于天然中草藥中的毒性成分進行測定的實例，如LC-HR-MS/MS分析麻黃堿及草藥中的提取物烏頭堿、鉤葉堿、次烏頭堿、紫堇堿、原甲素、四氫小檗堿等。

金域臨床質譜檢測中心 趙蓓蓓

報告題目：質譜技術與微量元素檢測

　　微量元素指在體內含量少于體重0.01%的元素，微量元素過低會導致營養不良，生理正常功能受限；過高又會產生毒副作用，甚至導致死亡。微量元素的主要檢測方法以原子光譜法、原子發射光譜法、原子吸收光譜法、電化學分析法、電感耦合等離子質譜法為主。原子吸收光譜法為目前使用最廣泛的檢測技術，行業公認檢測微量元素的“金標準”為電感耦合等離子質譜法（ICP-MS）。ICP-MS在檢測全血、尿碘和尿鎘的方法，與其他方法相比，具備檢出限低，精密度好，樣品前處理簡易等技術優點。金域醫學在尿碘的研究中獲得了大量的數據，針對碘缺乏或過量的高危人群，建議定期檢測碘營養水平。對于分析微量元素，絕大部分微量元素可由單四極桿質譜完成檢測；質譜干擾嚴重的元素檢測項目，優選三重四極桿質譜儀；進行同位素比值分析時，優選多接收器扇形磁場ICP-MS；進行元素形態分析時，選用色譜與ICP-MS儀器聯用。未來期望ICP-MS與其他技術的聯用，進一步拓展微量元素檢測的臨床價值與意義。

鄭州大學第一附屬醫院副主任藥師 孫志

報告題目：基于整合質譜平臺的臨床多需求、廣覆蓋毒檢技術研究與應用

　　據統計，每年因接觸毒性物質而需要醫學幫助的約占總人口數的1%。我國近年“中毒與傷害”均排在第五位，滿足臨床毒物檢測需求、提升毒物診斷治療水平是當前臨床急需解決的迫切問題。高分辨質譜（HRMS）在臨床有機毒物定性篩查研究與應用表現出高靈敏度、超高分辨率和強大的定性能力的優勢，如患者誤食標識“滅草松”農藥后，在血和尿液中同時檢測出百草枯和滅草松；ICP-MS檢測患者血液中的金屬元素；MALDI-TOF針對生物毒素的鑒定；離子色譜串聯質譜（IC/IC-MS）對離子型毒物鑒定，如：患者血液中檢測草甘膦異丙胺鹽成分的鑒定、亞硝酸鹽成分的定量等基于質譜技術的中毒毒物譜庫建設及臨床快速鑒定項目，經河南省醫學會評審為“2020年度河南醫學科技一等獎”，為臨床的及時合理救治提供科學的診斷參考依據。

蛋白定量主題報告

上海市臨床檢驗中心臨床副主任技師 李卿

報告題目：基于LC-MS的靶向蛋白定量應用案例

　　免疫法是臨床蛋白檢測的金標準，但存在交叉反應、干擾抗體、難以同時檢測多個項目以及蛋白異構體和翻譯后修飾無法區分等問題，LC-MS定量蛋白的難點在于對肽段的選擇和實驗室直接難以保持一致性。質譜法測定因有成熟的參考方法而又具有一定優勢，在多項目檢測上的精密度、溯源性和穩定性也有獨特的優勢，LC-MS法MRM檢測13種載脂蛋白，使12%的患者得到了更合適的風險分類。同時避免了抗Tg自身抗體的干擾。將免疫法和質譜法結合后，可對ng/mL級的樣本進行前處理，通過抗體+磁珠，進行親和富集，因LC-MS與免疫法存在一定的相關性，使用針對目標肽段及其同位素標記肽段的抗體，靈敏度可提高1000-10000倍。

北京臨床檢驗中心 張瑞

報告題目：糖化白蛋白質譜準確定量檢測方法建立

　　糖化白蛋白（GA）是葡萄糖與血清蛋白發生的非酶促糖化產物，反應患者2-3周的血糖水平，在2015版血糖監測臨床應用指南中，對糖尿病管理中血糖監測至關重要。同時也是反映應激性高血糖、妊娠狀態、糖尿病初步診斷與調整治療的重要參考指標。GA目前檢測方法主要有HPLC、ID-LC/MS、免疫法、親和層析和同胺氧化酶法等。GA標準化研究現狀：有些試劑盒溯源性不明確；校準品可能存在基質效應。建立GA標準化檢測方法要根據量值溯源、室間質評和室內質控三因素綜合分析。北京臨床檢驗中心“基于質譜法原理的血清糖化白蛋白參考測量體系的建立及其在糖尿病診斷中的應用價值研究”為國自然-面上科學基金項目，制定的《血清糖化白蛋白檢測方法及其專用候選標準物質》已獲得ZL；正在申請《糖化賴氨酸及同位素標記糖化賴氨酸的合成方法》、《一種人血清中白蛋白分離純化方法》兩項ZL。