組織培養中，除某些培養材料要求在黑暗中生長外，一般均需要光照。與自養的整體植株不同的是，用于組織培養的培養基含有足夠的碳水化合物，因之對培養的材料來說，通過光照來進行光合作用不是—·個必需的活動，但光照對于苗的形成，根的發生，葉狀枝的分化和胚狀體的形成都是重要的條件。
對于組織培養是否需要光照，不能一概而論。在組織培養過程中，包含了脫分化和再分化兩個階段，中間以愈傷組織分開，所以在外植體形成愈傷組織的過程中（即脫分化）不需要光照；而在愈傷組織形成根、芽，直到植株的時候，就需要光照了。而且，不管是對根細胞的組織培養，還是對其他任何細胞的組織培養，他們在再分化階段仍然需要光照，因為組織培養是培養成一個完整的植株，而不是只培養成根或芽。