案例經過
61歲的林大伯平時無煙酒嗜好,喜好散步。近4個月來,林大伯每于飯后自感胸悶,平時常感頭暈。在省城大醫院就診時,查血壓140/92mmHg,患者一般病史及臨床檢查都可,查血液心肌酶譜、肌鈣蛋白I、血液生化和凝血指標均正常,僅D-二聚體輕度增高,甘油三酯(TG)195mg/dl。胸部X線檢查心、肺和膈未見明顯異常,胸部CT平掃、增強未見有明顯異常。雙肺動脈CT及MRI均未見有明顯異常。經行冠脈造影術亦提示未見明顯異常,心臟超聲檢查正常。給予降壓、降脂、抗凝等對癥治療,患者癥狀好轉。
患者經治療后查了兩次BNP,檢驗結果分別為1671.7 pg/ml和1890.28 pg/ml,這么高的BNP值卻沒有一點心力衰竭癥狀,主治醫師又讓患者去急診室查NT-proBNP,結果<60 pg/ml,于是做好了解釋,果斷讓其出院,讓他繼續門診隨訪。
鑒于該患者BNP檢測值異常卻無心衰癥狀的現象,主治醫師電郵請教了一位BNP與心力衰竭方面的專家,該專家認為可能由于免疫檢測中的異嗜性抗體干擾因素導致BNP假性升高。之后也證實林大伯二十幾年前曾在田間勞作時有被老鼠嗜咬出血史。被老鼠咬過的人才有可能在體內產生異嗜性抗體[1],造成被標記抗體識別錯誤,從而出現假陽性升高。后來檢驗醫師用ELISA檢測到了林大伯體內存在較高水平的人抗鼠抗體(HAMA),也用幾種方法證明了林大伯血漿BNP其實是正常的。
分析與心得(臨床)
BNP在心室合成,它的含量與左心室壓力等密切相關。基本上心功能不全越嚴重,BNP水平越高。心力衰竭Ⅰ級(紐約心臟協會分級標準)平均BNP水平是(162±16)pg/ml,Ⅱ級是(332±25)pg/ml,Ⅲ級是(590±31)pg/ml,Ⅳ級是(1960±34)pg/ml。這有助于心力衰竭的鑒別、治療效果、預后的判斷等臨床應用[2]。但在臨床上,由于患者病情復雜,BNP的升高是否可以診斷心力衰竭需要深刻了解BNP在臨床診斷心力衰竭中的干擾因素,包括BNP檢測方法學上的干擾。此案例從檢驗醫生的角度考慮,患者血漿BNP的結果是“真實的”,而且多次檢測還是很高。從臨床醫生的角度考慮,患者血液中存在高水平的BNP,其值相當于心力衰竭Ⅳ級,應該進一步進行詳細的臨床檢查。本案例中,患者經全面檢查,臨床醫師對于出現有異于臨床癥狀的BNP異常增高檢驗值進行追根窮源,與檢驗醫師及時溝通,最終證實BNP升高歸因于患者血液標本的特殊性和方法的局限性,使得出現的問題及時得到科學、合理的解釋,減少了醫患糾紛。
深度拓展(技術)
案例中提到的“HAMA”,小編有話要說。(感謝抗體中心對以下內容的指導)
HAMA(Human anti-mouse antibodies,人抗鼠抗體效應。鼠源性單抗對人體具有異種蛋白的免疫原性,在人體內半衰期較短 ,多次使用可引起人抗鼠抗體 (HAMA)的產生,從而使其應用受到限制。
產生HAMA的原因主要有兩個:經常接觸老鼠;腫瘤病人進行鼠單克隆抗體的治療。
HAMA效應的效應的假陽性模式(以乙肝檢測為例):
標本中的人抗鼠抗體分別與固相HBsAb和標記HBsAb McAb(單克隆抗體)結合,形成固相HBsAb-HAMA-HBsAb復合物(雙抗原夾心),產生假陽性檢測信號。

如何消除HAMA反應:
1.采用非鼠源的PcAb(多克隆抗體)或者不同種屬的單抗
2.切掉抗體FC段或者改造為其他種屬抗體的FC段
3.使用阻斷劑可以有效降低HAMA效應,但對于某些極強反應可能效果不太理想
還有一種易出現“假陽性”的情況……
RF引起的假陽性
RF是一種自身抗體,能和多種動物IgG的Fc段結合。由于固相抗體和標記抗體均為IgG,雙抗體夾心法測抗原可能有RF的干擾,產生假陽性。

解決辦法:
1.用IgG的Fab或F(ab’)片段作酶結合物替代完整的IgG;
2.標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑G蛋白)處理;
3.將熱變性IgG加入到標本稀釋液中;
4.加入羊抗人IgG。
小結
綜上,基于雙抗體夾心檢測是目前免疫學檢測的主流方法,采用不同的標記方案可以實現高特異性、高靈敏度和快速檢測的目的。但是,由于采用的抗體原料不同而導致的臨床檢測數據的不同及抗干擾能力的不同,時常會給臨床檢測帶來困擾,在遇到這類檢測數據時,臨床上不能單一依靠某個檢測項目的異常而對患者病情進行判斷,要綜合患者臨床表現及其它項目結果,同時還要考慮到檢測原理對易出現的干擾進行排除。
準確的檢驗結果是檢驗和臨床的共同責任。檢驗工作必須要和臨床配合與溝通才能高效、快速、準確地為臨床提供檢測結果。