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  • 發布時間:2022-11-16 09:55 原文鏈接: 舉例介紹親和標記的原理和方法

    親和標記指用對具有特異的親和性物質中導入化學反應基團的試劑,有選擇地修飾存在于活體高分子的對應結合部位的官能基。

    因根據親和標記的目的而設計的試劑,對相應的活體高分子具特異的親和性,故形成試劑與活體高分子的特異的復合體,結果在結合部位試劑之濃度特別高,因而結合部位的官能基得到良好的修飾。

    例如,對以芳香族氨基酸為特異的基質的胰凝乳蛋白酶,用基質類似物的TPCK(L-1-甲苯磺酰胺-2-苯乙基氯甲基酮)與之反應,則TPCK在苯丙氨酸之側鏈部分與胰凝乳蛋白酶進行特異的結合,在氯化甲酮部分反應,只是在活性部分存在的組氨酸殘基有選擇地烷基化。為了標記酶的活性中心。

    效應物的結合部位、抗體的抗原(或不全抗原)的結合部位、受體的激素或神經傳遞物質結合部位、植物外原凝集素的糖結合部位和核糖體的核酸結合部位等,分別設計出導入與之相應的活體分子化學反應基的試劑。

    最近基于這樣的目的,即從一般與化學試劑反應性低的殘基所結合的部位為特異標記,應用了導入在光照下獲得高度化學反應性的基團的活體分子類似物(光親和標記photoaffinity labeling)。

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