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  • 發布時間:2020-08-11 11:19 原文鏈接: 乙二醛/DMSO變性瓊脂糖凝膠電泳

    試劑、試劑盒 10XBPTE 電泳緩沖液 二甲基亞砜(DMSO) 去離子乙二醛 乙一醛反府混合液 上樣緩沖液

    儀器、耗材 水平電泳裝置

    實驗步驟

    (一)村料與設備


    1)10XBPTE 電泳緩沖液:100 mmol/LPIPES,300 mmol/LTris,lOmmol/LEDTA(pH8.0)


    2) 二甲基亞砜(DMSO)


    3) 去離子乙二醛


    4) 乙一醛反府混合液:6 mlDMSO,2 ml 去離子乙二醛,2 mL10XBPTE 電泳緩沖液,0.6 ml80% 甘油,0.2 ml 溴化乙錠(10 mg/ml)


    5) 上樣緩沖液:50% 甘油.10 mmol/L 磷酸鈉 (PH7.0),0.25% 溴酚藍,0.25% 二甲苯青


    6) 水平電泳裝置


    (二)操作方法


    1) 制備凝膠:用 1XBPTE 電泳緩沖液配制 1.2% 的瓊脂糖凝膠


    2) 電泳:向 1?2ulRNA 樣品 (總共 10ug)中加入 10ul 乙二醛反應混合液,55℃ 保溫lh,冰浴 10 min, 離心,加入 1?2ul 上樣緩沖液,立即上樣電泳,用 1XBPTE 作電泳緩沖液,在 60℃ 恒壓下電泳,當溴酚藍遷移至 1/2?2/3 時,停止電泳。


    3) 觀察結果:在紫外燈下觀察結果


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