乙酰膽堿受體分布于神經肌肉接頭等處,蛇毒素可與之緊密結合,并連接過氧化物酶,通過化學反應可在電鏡下觀察到乙酰膽堿受體分布。
| 實驗材料 | 組織樣品 |
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| 試劑、試劑盒 | 磷酸鉀戊二醛KOH蔗糖焦銻酸鉀鋨酸 |
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| 實驗步驟 | 1. 組織切成約 1 mm3 的小塊,用 0.09 mol/L 磷酸鉀(或草酸鉀)-3% 戊二醛(pH 7.3,用 0.1%~1% KOH 調 pH)固定 4 h 以上,4℃。也有人推薦固定早期用微波照射,以加速固定液滲入細胞內部(關于微波照射使用情況參見有關章節)。
2. 固定后用 0.09 mol/L磷酸鉀(或草酸鉀)-4% 蔗糖(pH 7.3)漂洗 2~4 h,換液 3 次。
3. 1.5%~2% 焦銻酸鉀-1% 鋨酸 4℃ 固定 2 h。
4. pH 10 的蒸餾水漂洗 3 次×10 min,以洗盡殘留的焦銻酸鹽。
5. 脫水、包埋同常規,切片,染色或不染色。 展開 |
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