(一)化學顯色法。
用蒸餾、擴散等技術將生物材料中的乙醇分離出來,然后采用磺酸鹽、碘仿、重鉻酸鉀反應進行檢驗。其中重鉻酸鉀法使用比較普遍,主要原理是根據乙醇的揮發性和還原作用,在微量孔威(Conwag)擴散池中,外室試樣中的乙醇從試樣中擴散出來,與內室的重鉻酸鉀反應,根據還原的程度進行定性、半定量析。但這些顯色方法并非對乙醇專一,因為檢材中的丙酮、乙醛、甲醇、丙醇等其它揮發性物質干擾乙醇的測定。因此,在許多情況下,解決對乙醇的定性和定量問題都存在困難。
(二)氣相色譜法。
由于氣相色譜技術的高分離效能和高的靈敏度,近10多年來,檢驗乙醇中毒已廣泛采用了氣相色譜法。根據其進樣技術可分為兩種方法:一是液上氣體分析法;二是直接進樣分析法。
1.液上氣體分析法(GC Headspace Analysis)。指對液體或固體中揮發性成份的蒸汽相進行氣相色譜分析的一種間接手段,它是在熱力平衡的蒸汽相與被分析樣品共存于同一密閉系統中進行的。對于乙醇的分析,是將含乙醇的檢材(血液、玻璃體液、尿、膽汁或搗碎成勻漿狀的組織檢材)置于一密閉的小瓶中或試管中,經一定時間的恒溫加熱,乙醇即從液相擴散到液上空間,并在液相和氣相兩相間達到平衡,然后抽取液上氣體注人色譜儀中進行測定,并將已知濃度的標準乙醇溶液加人空白檢材中,在完全相同的條件下測定,根據保留時間和峰高或峰面積進行定性、定量。
2.直接注人法。是將血液樣品或其它體液檢材進行稀釋(組織樣品勻漿)后,加適量的內標溶液,于具塞離心試管中,充分混勻后離心,取上清液注人氣相色譜儀中分析測定。
3.氣相色譜條件。乙醇分析色譜檢測器大多采用氫火焰離子化檢測器(FID),填充物通常使用Carbowax固定液或PorapakQ固定相,Carbowax為聚乙二醇,特別適合于分析分離醇類物質,而PorapakQ等高分子多孔微球,無需涂固定液,使用方便,基線穩定,適用范圍寬,被廣為采用。