乳房縮小整形術組織標本中上皮細胞的制備
IrECM三維培養乳腺干細胞
| 實驗方法原理 | |
|---|---|
| 實驗材料 | 組織標本 |
| 試劑、試劑盒 | 無菌DMEM F12 50:50 加人1.2 mg ml重碳酸鹽 CMD3培養基 膠原酶 900 IU ml Vitrogen 解剖刀 培養瓶 625px2 Vitrogen包被 8μg cm2 |
| 儀器、耗材 | 搖床 離心管 |
| 實驗步驟 |  (a)手術后，立即將組織標本轉移至DMEM/F12(1:1)。 (b)用兩把解剖刀（每只手一把）將組織剪成約2 mm的小塊。 (c)置搖床上（60 r/min)，37℃,膠原酶消化24?48h。 (d)離心消化物數秒鐘，175g，脂肪和富含脂質的細胞漂浮于上清液的上方，將其棄去；上清液中主要含有血管來源的小粒和單個細胞；沉淀中含有血管和上皮來源的較大組織樣顆粒。 (e)用10ml DMEM/F12重懸沉淀。在30s內，上皮來源的組織樣大顆粒會沉淀，血管來源部分則懸浮于培養基中。因為它們最終也會沉淀下來，所以應該同上皮來源的組織樣大顆粒分離。通常，再經過兩輪重懸沉淀，就可以將上皮來源的組織樣大顆粒與血管分離。 (f)離心d步驟中的上清液，125g,5 min。沉淀中含有小血管。棄去上清，離心，500g,10 min,則沉淀中含有成纖維細胞。 (g)將上皮來源的小粒，種植到Vitrogen包被的625px2培養瓶中。必要時，其他部分也可種植。 (h)加人CDM3培養基，培養瓶置于37℃，5% CO2溫箱中 展開 |
乳腺癌是女性中發病率最高的癌癥。近年來的研究表明，轉錄因子KLF5在乳腺癌的發生發展過程中發揮重要作用；前期的研究表明，KLF5在乳腺癌干細胞的自我更新和維持過程中發揮關鍵的促進作用（Theranos......
一項最新研究發現，作為免疫系統中最復雜角色之一的巨噬細胞具有撫育細胞的功能，研究表明巨噬細胞在維持乳腺干細胞微環境方面發揮了重要的作用。一項最新研究發現，作為免疫系統中最復雜角色之一的巨噬細胞具有撫育......
10月19日，國際學術期刊《自然》（Nature）在線發表了中國科學院上海生命科學研究院生物化學與細胞生物學研究所/細胞生物學國家重點實驗室曾藝研究團隊的研究成果——IdentificationofM......