二代測序原理及應用

二代測序原理及應用如下：

一、原理

二代測序原理也就是文庫構建，PCR產生的片段或基因組打斷的片段兩端需要添加接頭修飾才能進行測序。

1、末端修飾。打斷的片段是隨機斷裂，其末端可能是不平的。因此，建庫第一步是補齊不平的末端。

2、添加接頭。經過末端修飾后的DNA片段3’末端具有突出的A尾，而接頭具有突出的T尾，可以使用連接酶將接頭添加到DNA片段兩端，形成“Y”形接頭。

3、PCR擴增。添加了接頭的DNA片段，可通過與接頭互補的引物來擴增，富集文庫。

二、應用

二代測序技術相對一代測序大大降低了測序成本并大幅提高了測序速度，應用非常廣泛，如突變體的定位，尋找SNP位點，全基因組甲基化測序等。

二代測序技術在此次新型冠狀病毒疫情防控中發揮了很大的作用，人們直接通過測序掌握了該“不明原因肺炎”的基因組序列，從而進一步研發出相關檢測試劑，以助于人們快速地搜索和排除相關病例，對于我國快速有效地控制疫情具有重大的意義。