實驗方法原理
實驗材料 酶樣品
試劑、試劑盒 Tris-HCl氯化鎂亮氨酸亮氨酰
儀器、耗材 分光光度計
實驗步驟
實驗所需「試劑」具體見「其他」
1. 加樣
2. 計算
25℃ 時，于 238 nm 處吸收值降低。
空白對照用 0.8 ml 0.0625 mol/L 亮氨酸代替亮氨酰，并且忽略實驗混合物中的水量。
于 238 nm（am＝吸收值/亮氨酰濃度）處，借助于校準曲線可測得酶的活性。
注意事項
其他
試劑：
0.5 mol/L Tris-HCl，pH 8.5
0.025 mol/L 氯化鎂（MgCl2·2H2O，Mr＝161.9；40.5 mg 溶于 10 ml 水中）
0.1 mol/L 氯化鎂（MgCl2·6H2O，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水中）
0.0625 mol/L 亮氨酸（Mr＝131.2；820 mg 溶于 100 ml 水中，調至 pH 8.5）
0.125 mol/L 亮氨酰（亮氨酰鹽酸，Mr＝166.7；2.08 g 溶于 100 ml，調至 pH 8.5）
酶樣品 ［LAP（0.1 ml 約相當于 0.4 mg）必須在 37℃ 激活，在使用前先在 0.05 ml 0.025 mol/L MnCl2、0.05 ml 0.5 mol/L Tris-HCl pH 8.5、0.8 ml 水的混合物中培養 2 h］