半抗原與載體蛋白的耦聯物稱之為人工抗原。載體不僅是簡單地增加半抗原的分子質量，更重要的是利用其強的免疫原性誘導機體產生免疫應答，對半抗原發生載體效應的作用。蛋白質結構越復雜，免疫原性越好。常用的載體蛋白有牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白（OVA）、兔血清白蛋白（RSA）、人血清白蛋白（HSA）、人γ球蛋白（γ－GA）、人血纖維蛋白、鑰孔血藍蛋白（KLH）、甲狀腺球蛋白（thyroglobulin）、豬血清白蛋白（PSA）等。
半抗原含有的活性基團不同，半抗原與載體蛋白耦聯的方法也不同。通常，含羧基的半抗原采用碳二亞胺（EDC）法、混合酸酐（MA）法和Woodward試劑法；含羥基的半抗原采用琥珀酸酐法；含羥基的半抗原采用戊二醛法、一氯醋酸鈉法和偶氮苯甲酸法；含酚基的半抗原采用重氮化法；含氨基的半抗原采用Mannich反應、重氮化法和丙烯酸法、二異氰酸酯法、鹵代硝基苯法、亞胺酸酯法；含酮基的半抗原采用氨基氧乙酸法；含巰基的半抗原采用SAMSA（S－乙酰基巰基琥珀酸酐）法等。耦聯后的人工抗原往往需要進一步純化。透析是常用的方法，還可采用凝膠柱層析的方法分離。半抗原與載體蛋白的分子結合比對抗體特異性和效價有一定的關系。一般認為人工免疫抗原結合比高，可以增加免疫刺激的強度和特異性。
目前，絕大多數農藥人工抗原是通過將單一農藥半抗原耦聯到載體蛋白分子上的方法獲得的。所獲得的抗原稱之為單一決定簇人工抗原。王姝婷等通過對人工抗原的設計，將克百威、三唑磷、毒死蜱和甲基對硫磷半抗原耦聯到一個載體蛋白分子上，制備出了多抗原決定簇的人工抗原，并獲得了能同時識別上述4種農藥的“寬譜特異性”（broadspecificity）多克隆抗體。這為農藥人工抗原的制備提供了一種新的途徑和策略。