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  • 發布時間:2020-05-27 10:58 原文鏈接: 人抗內因子抗體(IFA)ELISA試劑盒分析檢測說明

    本試劑盒僅供研究使用。

        檢測范圍:48T25ng/L-800ng/L

        使用目的:

        本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關本試劑盒僅供研究使用。

        檢測范圍:48T25ng/L-800ng/L

        使用目的:

        本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本抗內因子抗體(IFA)含量。

        實驗原理

        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人抗內因子抗體(IFA)水平。用純化的人抗內因子抗體(IFA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗內因子抗體(IFA),再與HRP標記的抗內因子抗體(IFA)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗內因子抗體(IFA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人抗內因子抗體(IFA)濃度。

        試劑盒組成

        1.30倍濃縮洗滌液20ml×1瓶;2.酶標試劑6ml×1瓶

        3.酶標包被板12孔×8條;4.樣品稀釋液6ml×1瓶

        5.顯色劑A液6ml×1瓶;6.顯色劑B液6ml×1/瓶

        7.終止液6ml×1瓶;8.標準品(48ng/ml)0.5ml×1瓶

        9.標準品稀釋液1.5ml×1瓶;10.說明書1份

        11.封板膜2張;12.密封袋1個

        150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

        2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

        3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

        4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

        5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

        6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

        7.溫育:操作同3。

        8.洗滌:操作同5。

        9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

        10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

        11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

        ELISA試劑盒的優勢:

        全面——混合8種不同的常見抗原,對自身免疫性疾病進行全面篩查。

        快速——檢測時間短(~2小時),確診時間更早。

        準確——ELISA檢測方法,靈敏度高,特異性強,適用性好。

        質優——美國技術開發,高品質及高可靠性的分析性能。

        價低——國內自生產,符合國內實情,降低生產成本。

        Elisa試劑盒組織結構:

        1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

        2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

        3、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

        4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

        5、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

        注意事項:

        1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

        2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

        3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

        4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

        5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

        6.底物請避光保存。

        7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

        8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

        9.本試劑不同批號組分不得混用。

        10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

        保存條件及有效期

        1.試劑盒保存:;2-8℃。

        2.有效期:6個月

        液體樣本抗內因子抗體(IFA)含量。

        實驗原理

        本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人抗內因子抗體(IFA)水平。用純化的人抗內因子抗體(IFA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗內因子抗體(IFA),再與HRP標記的抗內因子抗體(IFA)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗內因子抗體(IFA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人抗內因子抗體(IFA)濃度。

        試劑盒組成

        1.30倍濃縮洗滌液20ml×1瓶;2.酶標試劑6ml×1瓶

        3.酶標包被板12孔×8條;4.樣品稀釋液6ml×1瓶

        5.顯色劑A液6ml×1瓶;6.顯色劑B液6ml×1/瓶

        7.終止液6ml×1瓶;8.標準品(48ng/ml)0.5ml×1瓶

        9.標準品稀釋液1.5ml×1瓶;10.說明書1份

        11.封板膜2張;12.密封袋1個

        150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

        2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

        3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

        4.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

        5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

        6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

        7.溫育:操作同3。

        8.洗滌:操作同5。

        9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

        10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

        11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

        ELISA試劑盒的優勢:

        全面——混合8種不同的常見抗原,對自身免疫性疾病進行全面篩查。

        快速——檢測時間短(~2小時),確診時間更早。

        準確——ELISA檢測方法,靈敏度高,特異性強,適用性好。

        質優——美國技術開發,高品質及高可靠性的分析性能。

        價低——國內自生產,符合國內實情,降低生產成本。

        Elisa試劑盒組織結構:

        1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

        2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

        3、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

        4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

        5、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

        注意事項:

        1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

        2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

        3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

        4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

        5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

        6.底物請避光保存。

        7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

        8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

        9.本試劑不同批號組分不得混用。

        10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

        保存條件及有效期

        1.試劑盒保存:;2-8℃。

        2.有效期:6個月


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