人流產胎兒成纖維細胞和包皮來源成纖維細胞的取材

實驗概要

人流產胎兒成纖維細胞（Human fetal fibroblast）和包皮來源成纖維細胞的取材

主要試劑

細胞基礎培養液、DPBS、0.25%Trypsin

主要設備

35 mm培養皿、4孔培養板、濾器、2 mL、5 mL、10 mL、15 mL、25 mL、50 mL離心管，T25培養瓶、細胞計數儀、巴斯德管、倒置顯微鏡、培養箱、水浴鍋、生物安全柜、體視鏡

實驗材料

流產胎兒皮膚、包皮（取自醫院，需簽知情同意書）

實驗步驟

①取流產胎兒腹部皮膚或者包皮約3 cm²，置于盛放DPBS的35 mm培養皿中，剪碎成1 mm²。
②收集組織塊轉移至15 mL離心管中，室溫1000 r/min離心3 min。
③棄去上清，以細胞基礎培養液重懸組織塊，轉移至T25培養瓶中，盡量使組織塊均勻分布，同時小心吸去組織塊周圍的培養液。
④倒置培養瓶過夜，次日翻轉，加入1.5 mL細胞基礎培養液。
⑤隔日更換新鮮培養液，約7日可見組織塊周圍有細胞爬出
⑥0.25%Trypsin消化傳代