定標的意義:定標就是要找出一個參考點,就是一個K值。它是由儀器與試劑狀態確定下來的。當我們測定一個標本時,無論您是用手工的方法或全自動生化分析儀,測出來的值只是一個吸光度,這個吸光度對我們沒有什么意義,我們要把這個吸光度轉化成一個濃度或是酶的活性。
那就要乘上一個K值,計算并打印出來的結果對我們就有意義了。K值就是我們通過定標找出來的。一般上最低要求是由試劑空白與標準品。經過儀器測定出兩個吸光度。
K=標準濃度/(A標準-A試劑空白)
標準液的濃度我們是知道的,這兩個吸光度可以由儀器測出,這樣就得出一個K值。無論什么樣的標本,用其吸光度乘以K值我們就得到了答案。因此,K值具有非常決定性的意義,可以決定標本的準確性。
K值的決定因素:我們看看K值會受到什么影響呢?
第一,標準液的濃度一定要準確。
第二,標準液的吸光度與試劑空白的吸光度一定要準確。吸光度受儀器狀況、試劑狀況的影響,如果您的儀器相當穩定,試劑是影響K值的一個主要因素。
如何確定K值是正確的?一般我們用質控血清來檢查,最好是兩種水平的質控來檢查,如果質控結果很好,可以說K值是準確的,用這個K值計算出來病人的結果也是準確的,所以K值非常關鍵。
K值的真面目:K值實際上代表了斜率,截距代表試劑空白,試劑空白每天都在變化,所以K值的穩定性決定您的儀器與試劑,如果儀器與試劑都十分穩定,那K值也很穩定。
多長時間定一次標合適?這要看您試劑的穩定性,質控結果不好,有些項目做試劑空白可以解決,有些項目要做兩點定標。
酶的項目如何確定K值:一是計算出來的理論K值;
K = (TV × 1000)/(SV × L × ε)
二是用有酶項目的定標液得出K值:目前各公司可以提供多項目的定標液,不僅有底物類的項目,也有酶類的項目。