實驗材料 海膽和沙幣
試劑、試劑盒 KCl 溶液3-氨基-124-三唑
儀器、耗材 巴斯德吸管Nytex 濾器
實驗步驟
一、海膽和沙幣體腔內注射 0.5 mol/L 的 KCl
1. 制備 0.5 mol/L 的 KCl 溶液。
2. 用海水沖洗一下動物以去掉顆粒物質。
3. 用一個 23~26 號的針頭向動物的口緣空腔內注射多達 500 μl 或 100 μl KCl。
4. 用巴斯德吸管收集“干”精子，并儲存于置于冰上的小塑料管中。‘
5. 將雌性動物在一杯海水中翻過來收集卵子。
6. 用 Nytex 濾器洗卵子，以去掉顆粒，并使卵子吸附到濾膜上。
7. 通過將水吸走或小心倒掉，再加入潔凈的海水將卵子洗幾遍。
二、海膽的電刺激
1. 將海膽反口面向上放在紙巾上。
2. 將兩個電極一邊一個放在接近生殖管的貝殼部位，配子就會從生殖孔中釋放出來。
3. 如果需要，在生殖管周圍的幾個部位通以電流。
4. 開始收集卵子和精子，并受精。
三、海膽和沙幣卵的受精
1. 制備稀釋的精子懸液。
2. 向洗過的卵中加入精子。
四、受精膜的去除
1. 獲取卵子。
2. 將卵子重懸于含有 1mmol/L 3-氨基-1,2,4-三唑的海水中。
3. 受精。
4. 當受精膜出現后，將卵子倒入直徑比卵子小幾微米的 Nytex 網中