1、附著型胞(adherentcell)
(1)吸掉舊培養液。
(2)用D-PBS洗滌細胞一至二次。
(3)加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2),37℃作用數分鐘,于倒立顯微鏡下觀察,當細胞將要分離而呈現圓粒狀時,吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去trypsin-EDTA,則在trypsin-EDTA作用后,加入適量含血清之新鮮培養基終止trypsin作用,離心后再吸掉上清液。
(4)輕拍培養瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量之新鮮培養基,以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊,混和均勻后,依稀釋比例轉移至新的培養瓶中,以正常培養條件培養。
2、懸浮型細胞(suspensioncell)
(1)吸出細胞培養液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。
(2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養基,混和均勻后,依稀釋比例轉移至新的培養瓶中,以正常培養條件培養。
3、融合瘤(hybridoma)
有些hybridomacell需培養三天以上才會產生抗體,若是更換培養基,則可能會失去抗體。因此繼代培養不需離心后更換培養基,直接添加新鮮培養基稀釋細胞濃度即可。若體積太大,可傾斜放置,或分殖至新培養瓶中。