（一）體格檢查
1、詳細的體格檢查是病因診斷的又一主要線索。
2、體態較胖的中年女性應注意功能性低血糖癥。
3、如為向心性肥胖伴多毛、痤瘡、紫紋應考慮皮質醇增多癥。如體態消瘦、皮膚色素減少、毛發脫落、性腺及乳房萎縮常提示垂體功能低下；如體態消瘦、色素加深、低血壓等又提示阿狄森病的可能。
4、黏液性水腫體征提示甲狀腺功能減退的存在。肢端肥大癥外貌提示垂體生長激素瘤的存在。陣發性或持續性高血壓伴陣發性加劇應除外嗜鉻細胞瘤的存在。
5、皮膚、淋巴結、胸腹部檢查對肝源性低血糖、胰腺內或外腫瘤等的診斷常提供重要依據。
（二）實驗室檢查
1、血糖測定（血漿真糖）：多次測定空腹或發作時血糖。
2、口服糖耐量試驗（OGTT）
3、血漿胰島素測定（放免法）
4、C肽測定
5、刺激試驗
6、禁食試驗
7、胰島素釋放指數
于禁食24 h以上后取血測定血清胰島素（免疫法，IRI）及血糖（G）計算其比值IRI/G>0.4（正常<0.3）支持胰島素瘤診斷。
8、C肽抑制（胰島素耐量）試驗
9、膚島素原和胰島素原類似物（BKRA）測定
10、肝功能、腎功能、有關內分泌腺功能檢測對于肝源性、腎源性、內分泌性低血糖癥診斷有助。血鈣磷、堿性磷酸酶、尿鈣磷檢測對MEN-I型伴有胰島素瘤的診斷有助。腫瘤標志物的檢測對胰（島）外腫瘤性低血糖癥的診斷有助。
11、有關遺傳性酶系異常的化驗
（1）糖原累積癥中Ⅰ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅸ型伴發低血糖癥：
①胰高糖素肌注后，除Ⅲ型（脫枝酶缺乏）于高糖飲食后有升糖反應外余反應均較差或無反應。
②肝活檢及各種相應的酶測定有陽性發現。
③界限糊精試驗肝、肌肉、紅細胞、白細胞中有界限糊精存在Ⅲ型。
（2）其他酶缺乏有關檢驗見鑒別診斷內容。
（三）器械檢查
1、無創性檢查
如B型超聲、CT， MRI， ECT， X線拍片及胃腸造影等有助于腫瘤定位診斷。
2、有創性檢查
胰島素瘤定位診斷困難時選用下列檢查：
（1）腹腔動脈和胰動脈造影：胰島素瘤血運豐富，血管造影可顯示瘤直徑>O.5cm的腫瘤，陽性率80%。借此可顯示腫瘤數目、大小、位置。
（2）經皮、經肝門靜脈穿刺插管（PTPC），從胰、脾、門靜脈分段取血測定胰島素（放免法測定，IRI）。
（3）經動脈鈣刺激肝靜脈取血（ASVS）測定胰島素。