7.31/15mol/L磷酸鹽緩沖液（pH7.4）
成分：磷酸氫二鈉（Na2HPO4·12H2O） 19.077g
磷酸二氫鉀（KH2PO4） 1.814g
加蒸餾水至 1000mL
配制：將上述兩種成分溶于蒸餾水中。以pH試紙檢驗pH值。
7.4Giemsa應用液
取一份Giemsa染液與6份1/15mol/L磷酸鹽緩沖液混合而成。臨用現配。
8實驗動物和飼養環境
小鼠是微核試驗的常規動物。體重為25g ~30g。也可選用成年大鼠，體重為150g ~200g。
實驗動物及實驗動物房應符合國家相應規定。
9劑量分組
一般取受試物LD50的1/2、1/5、1/10、1/20等劑量，以求獲得微核的劑量-反應關系曲線。當受試物的LD50大于5g/kg體重時，可取5g/kg體重為最高劑量，一般至少設3個劑量。每個劑量組10只動物，雌、雄性各半。另外，還應設溶劑對照和陽性物對照組。常用環磷酰胺作為陽性物對照，劑量可為40mg/kg體重。
根據受試物的理化性質（水溶性和/或脂溶性）確定受試物所用的溶劑，通常用水、植物油或食用淀粉等。
10染毒途徑和方式
染毒途徑視實驗目的而定，建議采用經口灌胃方式。采用30h兩次給藥法，即兩次給受試物間隔24h，第二次給受試物后6h取材。
11試驗方法
11.1骨髓的制取
動物頸椎脫臼處死后，打開胸腔，沿著胸骨柄與肋骨交界處剪斷，剝掉附著其上的肌肉，擦凈血污，橫向剪開胸骨，暴露骨髓腔，然后用止血鉗擠出骨髓液。
11.2 涂片
將骨髓液滴在載玻片一端的小牛血清液滴里，仔細混勻。一般來講，兩節胸骨髓液涂一張片子為宜。然后，按血常規涂片法涂片，長度約2cm ~3cm。在空氣中晾干。若立即染色，需在酒精燈火焰上方，稍微烘烤一下。
11.3固定
將干燥的涂片放入甲醇液中固定5min。即使當日不染色，也應固定后保存。
11.4染色
將固定過的涂片放入Giemsa應用液中，染色10min ~15min，然后立即用1/15mol/L磷酸鹽緩沖液沖洗。
11.5封片
用濾紙及時擦干染片背面的水滴，再用雙層濾紙輕輕按壓染片，以吸附染片上殘留的水分，再在空氣中晃動數次，以促其盡快晾干，然后放入二甲苯中透明5min，取出滴上適量光學樹脂膠，蓋上蓋玻片，寫好標簽。
11.6觀察與計數
先用低倍鏡，后用高倍鏡粗略檢查，選擇細胞分布均勻，細胞無損，著色適當的區域，再在油浸鏡下計數。雖然不計數含微核的有核細胞，但需用有核細胞形態染色完好做好判斷制片優劣的標準。
本法觀察含微核的嗜多染紅細胞。嗜多染紅細胞呈灰藍色，成熟紅細胞呈淡桔紅色。微核大多數呈單個圓形，邊緣光滑整齊，嗜色性與核質相一致，呈紫紅色或藍紫色。
每只動物至少計數1000個嗜多染紅細胞。微核率指含有微核的嗜多染紅細胞數，以千分率（‰）表示之。若一個嗜多染紅細胞中出現兩個或兩個以上微核，仍按一個有微核細胞計數。
12數據處理和結果判斷
12.1數據處理
報告各組微核細胞率的均數和標準差，利用適當的統計學方法如Poinsson分布u檢驗比較受試物各劑量組與溶劑對照組的微核率。
12.2結果判定
根據OECD Guidelines for Testing of Chemicals的準則，如果受試物試驗組與溶劑對照組相比，統計學上有顯著性差異，并有劑量—反應關系則可認為微核試驗陽性。