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  • 發布時間:2020-08-24 13:07 原文鏈接: 體外抗藥腫瘤細胞模型的建立實驗

    實驗方法原理 抗藥性細胞模型的篩選大多采取長時間藥物處理、誘導抗性,最總篩選出具有一定抗性的細胞克隆。


    實驗材料 小鼠


    試劑、試劑盒 小牛血清DMEMDOX


    儀器、耗材 CO2培養箱無菌鋼圈


    實驗步驟


    一、培養條件


    用含10%小牛血清的DMEM培養液,5%CO2,37℃培養。


    二、實驗步驟


    1.  將CHO細胞培養在含10%血清的DMEM培養液中,先用DOX(阿霉素)0.01 ug/ml 誘導培養CHO細胞3個月。


    2.  然后在3個月內逐步增倍DOX的濃度達0.1 ul/ml,接著進行DOX低濃度的篩選。


    3.  隨后用無菌鋼圈套取抗性倍數較高的克隆RC1作CHO和RC1對DOX的劑量-反應曲線,求CHO和RC1的IC50值。


    4.  抗性倍數即為RC1的IC50與CHO的IC50。


    注意事項


    1.   要具備培養細胞的實驗室條件,謹防污染。


    2.  通過實驗計算出敏感細胞對該藥物的IC50值,以確定其實誘導濃度。


    3.  采用長期增量的培養法可產生穩定的抗藥性細胞株,對阿霉素等產生抗性的細胞株,往往對其他天然來源的抗腫瘤藥亦可產生抗藥性。


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  • 调性视频