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  • 發布時間:2019-04-04 10:41 原文鏈接: 體細胞融合實驗——懸浮培養細胞的融合

    實驗材料

    細胞

    試劑、試劑盒

    PEG1000

    儀器、耗材

    離心管

    實驗步驟

    1. 從無血清培養基中沉淀雜交前體細胞。

    2. 倒盡上清。

    3. 用手指彈撥管底或雙手搓轉離心管,使細胞重新懸浮。

    4. 加入 1 ml PEG1000,待 2 分鐘。

    5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培養基稀釋 PEG。于室溫,200 g 離心 5 分鐘沉淀細胞。

    6. 加 5 ml 含 10% FBS 的培養基,輕輕轉動離心管重懸細胞,盡量不要打碎細胞,按步驟 5 重新沉淀細胞。

    7. 最后一次以適量生長培養基重懸細胞,24~48 小時后加入選擇培養基。

    8. 篩選細胞:融合 12~24 小時后就可以進行異核體分析。

    展開


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