使用紫外可見分光光度法測定維生素B1片的含量

一、實驗資料

1、檢驗藥品

(1)檢驗藥品的名稱    維生素B1片。

(2)檢驗藥品的來源    市場購買或送檢樣品。

(3)檢驗藥品的規格、批號、包裝及數量    根據藥品包裝確定,并記錄有關情況。

2、質量標準

(1)檢驗依據    《中國藥典》(2010版)二部896頁“維生素B1片”。

(2)含量測定    取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于維生素B₁25mg),置100mL量瓶中,加鹽酸溶液(9→1000)約70mL,振搖15min使維生素B₁溶解,加鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度,搖勻,用干燥濾紙濾過,精密量取續濾液5mL,置另一100mL量瓶中,再加鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度,搖勻,照紫外-可見分光光度法[《中國藥典》(2010版)附錄Ⅳ A],在246nm的波長處測定吸光度,按C₁₂H₁₇ClN₄OS ? HCl的吸收系數()為421計算,即得。

本品含維生素B₁(C₁₂H₁₇ClN₄OS ? HCl)應為標示量的90.0%～110.0%。

3、檢驗原理

紫外吸收:維生素B₁分子中有共軛雙鍵,在紫外光區具有特征吸收峰,測定其最大吸收波長處的吸光度即可計算其含量。

定量基礎:紫外-可見吸收光譜為物質對紫外-可見光區輻射的能量吸收光譜,符合光的吸收定律(朗伯-比爾定律),即在一定實驗條件下,供試品溶液的吸光度與其濃度和液層的厚度成正比。它是紫外-可見分光光度法的定量依據。吸收定律可表示如下:

 A=Elc

式中    A——吸光度

           l——液層厚度

           c——溶液濃度

           E——吸收系數,即單位濃度、單位液層厚度時的吸光度

      吸收系數有兩種表示方式。

    (1)摩爾吸收系數(ε)    指在一定波長下溶液濃度為1mol/L,液層厚度為1cm時的吸光度。

    (2)百分吸收系數()    指在一定波長下,溶液濃度為1%(g/100mL),液層厚度為1cm時的吸光度。

二、實驗過程

1、儀器、試藥的準備及試液的配制

1)儀器的準備

紫外-可見分光光度計(配對石英比色皿)研缽、電子或分析天平(感量為0.1mg)、超聲波儀、離心機、濾紙、量筒、容量瓶(100mL,2個)、漏斗、玻璃棒、移液管(5mL)。

2)試藥試液的準備

維生素B₁片,鹽酸溶液(9→1000)。

2、操作步驟

(1)檢查儀器和比色皿是否齊全,是否有破損,開機預熱20min。

(2)檢查儀器波長的正確性和1cm石英吸收池的成套性。

(3)取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于維生素B₁25mg),置100mL量瓶中,加鹽酸溶液(9-1000)約70mL,振搖15min使維生素B₁溶解,加鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度。

(4)用干燥濾紙濾過,精密量取續濾液5mL,置另一100mL量瓶中,再加鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度,搖勻。

(5)用1cm石英吸收池,以鹽酸溶液(9→1000)作為參比溶液,在246nm的波長處測定供試品溶液吸光度。

3、結果計算

1)計算

按C₁₂H₁₇ClN₄OS ? HCl的吸收系數()為421計算,即得

式中    A——供試品溶液的吸光度

   ——供試品溶液的百分吸收系數

            l——吸收池的厚度

            D——供試品的稀釋倍數

            V——供試品溶液的體積

            W——供試品的取樣量

2)結果判定

(1)結果判定依據    本品含維生素B₁(12C₁₂H₁₇ClN₄OS ? HCl應為標示量的90.0%～110.0%。

(2)判定原則    如果含量計算結果在規定的范圍內,則該項檢查判為“符合規定”。

3)檢驗原始記錄

4)檢驗報告書