1.概述：依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-based amplification，NASBA)，又稱自主序列復制系統(self- sustainedsequence replication，3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.NASBA 主要用于RNA的擴增、檢測及測序.該反應有賴于AMV 逆轉錄酶，T7RNA多聚酶和核酸酶H(RNaseH)共同協作而完成。NASBA反應體系中除含有上述三種酶外，還含有核糖核苷，兩種特殊的引物和緩沖液。引物I 3‘末端與靶序列互補，5’端含T7RNA多聚酶的啟動子，這一引物是用于合成cDNA的.引物Ⅱ的堿基序列與cDNA的5‘ 未端互補。
2.原理：在NASBA反應時，首先引物Ⅰ與RNA模板復性( 結合)，AMV逆轉錄酶催化合成cDNA，RNaseH水解cDNA上的RNA，形成一條單鏈的DNA;引物Ⅱ隨即與此cDNA的5'未端結合，逆轉錄酶在此DNA模板的指導下合成第二條DNA鏈.這樣形成的DNA雙鏈含有T7RNA多聚酶的啟動子.該酶即以此DNA為模板，轉錄出與樣品RNA序列相同的RNA鏈，而且每條DNA模板在該酶的作用下可合成約100個拷貝的RNA.每條新的RNA又可作為逆錄酶的模板合成cDNA.如此反復進行，將獲得更多的RNA和cDNA.