NASBA的簡要過程如下：1.RNA模板鏈進入反應混合物后，第一個引物首先與模板鏈的3'端結束。2. 反轉錄酶，合成反義的補償的DNA鏈。3. RNA 酶H（一種核糖核酸內切酶，能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵，分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈，但不能消化單鏈或雙鏈DNA），分解破壞RNA模板鏈。4.第二個引物與DNA的5’端結合。5.T7 RNA polymerase 合成RNA補償鏈，并加入到步驟1中，使反應可以循環進行。NASBA技術已經被用于多個單鏈RNA基因組的病原性病毒的快速檢測試驗中。
標準的NASBA 反應體系中含有T7RNA聚合酶（一種RNA聚合酶，分子量約99kDa，專門催化5'→3'方向的RNA形成過程）、RNA se H（一種逆轉錄酶，可以消化mRNA）、禽骨髓白血病病毒（AMV）逆轉錄酶、核糖核苷三磷酸（NTP）、脫氧核糖核苷三磷酸（dNTP）、一對特殊引物及根據需要使用的各種反應緩沖液等。引物P1 長約45個堿基，其3’末端大約20 個堿基對與模板的3’末端互補，5’末端含有能被T7 噬菌體RNA 聚合酶識別的啟動子序列；引物 大約20個堿基長，其序列與模板的5’末端一致。AMV 的作用是以單鏈RNA 為模板合成互補的cDNA 及以cDNA 為模板合成雙鏈DNA。RNAseH 在體系中的作用是將RNA-cDNA 雜合分子中的RNA 降解，T7 噬菌體RNA 聚合酶則是識別雙鏈DNA 中的啟動子區，催化DNA 轉錄為RNA。