1.動物細胞培養
在所有的細胞離體培養中,困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。
⑴血清:動物細胞離體培養常常需要血清。常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子,如激素、微量元素、礦物質和脂肪。有一天人們真正學會了配制和血清一樣的培養液,那時血清才可被取代。在這里,血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。
⑵支持物:大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用玻璃,高速冷凍離心機,塑料等作為支持物。
⑶氣體交換:二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養過程中不斷進行調節,不斷維持所需要的氣體條件,每一次開箱操作后的快速恢復對設備的要求可想而知有多難?由此決定了動物細胞離體培養設備要求高、投資大。
2.植物細胞培養
⑴光照:離體培養的植物細胞對光照條件不甚嚴格,因為細胞生長所需要的物質主要是靠培養基供給的。但光照不但與光合作用有關,而且與細胞分化有關,例如光周期可對性細胞分化和開花調控作用,所以以獲得植株為目的的早期植物細胞培養過程中,光照條件特別重要。以植物細胞離體培養方式獲得重要物質,如藥物的過程,植物細胞大多是在反應器中懸浮培養。
⑵激素:植物細胞的分裂和生長特別需要植物激素的調節,促進生長的生長素和促進細胞分裂的分裂素是基本的激素。植物細胞的分裂,生長,分化和個體生長周期都有相應的激素參與調節。和動物細胞相比,植物細胞離體培養對激素要求的原理已經了解,其應用技術也已相當成熟,已經有一套廣泛作為商品使用的培養液。同時解決了植物細胞對水、營養物、激素、滲透壓、酸堿度、微量元素等的需求。
3.微生物細胞培養
微生物多為單細胞生物,野生生存條件比較簡單。所以微生物人工培養的條件比動植物細胞簡單得多。其中厭氧微生物培養比好氧微生物復雜,因為嚴格厭氧需要維持二氧化碳等非氧的惰性氣體濃度,而好氧微生物則只需要通過不斷攪拌提供無菌氧氣。微生物對培養條件要求不如動植物細胞那樣苛刻,玉米漿、蛋白胨、麥芽汁、酵母膏等成為良好的微生物天然培養基。對于一些特殊微生物的營養條件要求,可以在這些天然培養基的基礎上額外添加。
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