光電比色計采用濾光片獲得單色光,因為濾光片性能較差,只能得到近似的單色光,因而影響了光電比色計的靈敏度與準確度。
而采用分光光度法,又同時提高儀器的靈敏度。
有的儀器又同時用特制的光電管代替光電池,則又擴大了使用的光譜區范圍。
分光光度法是通過分光系統(又稱色散系統)將復合光渡分成一系列波長的單色光；
其中某一波長的單色光,可根據被測物質對某一渡長光渡的吸收強弱來選取。
分光光度計的分光系統又稱單色器,通常是采用援鏡將復合光分成單色光；其它部分的的造與光電比色計基本相同。
(1)分類
(2)基本工作原理
分光光度法的定量關系也可用朗伯一比爾定律表示。
分光光度法比光電比色法的靈敏度高,其靈敏度的表示方法有兩種二摩爾吸光系數e和禁德爾(SandeJ1)靈敏度S(又稱為靈敏度指數9)。
根據朗伯一比爾定律(式7-4)可知,大多數顯色反應的摩爾吸光系數為10~105,該值越大,表示該顯色反應靈敏度越高。
分光光度計的構造與使用
以721型分光光度計0為例介紹其構造與使用。
721型分光光度計適用手在可見光譜區的范圍360~800nm內進行定量比色分析用。
儀器在410~710nm之間可增加消光片或采用有色溶液作被測溶液的陪襯代替空自,以便提高分析靈敏度和提高消光讀數范圍。