鑒別
(1)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致(2)本品的紅外光吸收圖譜應與對照品的圖譜一致(通則
檢查
結晶性取本品,依法測定(通則0981),應符合規定。酸度取本品,加水制成每1ml中約含10mg的溶液,依法測定(通則0631),pH值應為3.5~4.5溶液的澄清度與顏色取本品5份,各1.0g,分別加水20ml溶解后,溶液應澄清無色;如顯渾濁,與2號濁度標準液(通則0902第一法)比較,均不得更濃(供非注射用);或與1號濁度標準液(通則0902第一法)比較,均不得更濃(供注射用);如顯色,與黃色2號標準比色液(通則0901第一法)比較,均不得更深。有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定。溶劑磷酸緩沖液(pH3.9)(取磷酸3.5ml,加水1000ml與濃氨溶液2.5ml,必要時用濃氨溶液調節pH值至3.9±0.05)-90%乙腈甲醇溶液(80:20)。供試品溶液取本品適量,精密稱定,加溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含3.57mg的溶液對照品溶液(1)取克林霉素磷酸酯對照品適量,精密稱定,加溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含357mg的溶液。對照品溶液(2)精密量取對照品溶液(1)適量,用溶劑定量稀釋制成每1ml中約含107pg的溶液。對照品溶液分別取克林霉素對照品與林可霉素對照品各適量,精密稱定,加對照品溶液(2)溶解并定量稀釋制成每lml中約含克林霉素磷酸酯107g、克林霉素30μg與林可霉素6g的混合溶液。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6mm250mm,5pm或效能相當的色譜柱);以磷酸緩沖液(pH3.9)90%乙腈甲醇溶液(92:8)為流動相A,以磷酸緩沖液(pH3.9)-90%乙腈甲醇溶液(52:48)為流動相B;按下表進行線性梯度洗脫;流速為每分鐘1.2ml;柱溫為40℃;檢測波長為210nm;進樣體積50l時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%595系統適用性要求對照品溶液色譜圖中,克林霉素磷酸酯峰的保留時間約為20分鐘,洗脫順序為林可霉素、克林霉素磷酸酯及克林霉素,林可霉素峰與克林霉素磷酸酯峰之間、克林霉素磷酸酯峰與克林霉素峰之間的分離度應分別大于30和6。對照品溶液(1)色譜圖中,雜質A峰(相對保留時間約為0.97)與克林霉素磷酸酯峰之間的分離度應不小于1.0測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖。限度供試品溶液色譜圖中如有與林可霉素和克林霉素保留時間一致的色譜峰,其含量按外標法以峰面積計算,分別不得過0.2%與0.5%;如有克林霉素B磷酸酯峰(相對保留時間約為0.75)、雜質A峰與其他雜質峰,按外標法以克林霉素磷酸酯峰面積計算,克林霉素B磷酸酯不得過1.5%或2%(供注射用);雜質A不得過1.5%或1.0%(供注射用);其他單個雜質不得過0.5%;其他雜質總量不得過2.0%或1.0%(供注射用),小于對照品溶液中克林霉素磷酸酯峰面積0.02倍的峰忽略不計。殘留溶劑照殘留溶劑測定法(通則0861)測定供試品溶液取本品約1.0g,精密稱定,置10m量瓶中,加水2ml與10%氫氧化鈉溶液1ml使溶解,用水稀釋至刻度,搖勻,精密量取2ml置頂空瓶中,密封。對照品溶液取乙醇、丙酮、三氯甲烷與吡啶各適量,精密稱定,用1%氫氧化鈉溶液定量稀釋制成每1ml中各約含乙醇25mg、丙酮25mg、三氯甲烷0.3mg與吡啶1mg的混合溶液,作為對照品貯備溶液;精密量取適量,用1%氫氧化鈉溶液定量稀釋制成每1ml中各約含乙醇0.5mg、丙酮0.5mg、三氯甲烷6g與吡啶20μg的混合溶液,精密量取2ml,置頂空瓶中,密封色譜條件以6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷為固定液(或極性相近)的毛細管柱為色譜柱,起始溫度為50℃,維持10分鐘,然后以每分鐘10℃的速率升溫至90℃,再以每分鐘30℃的速率升溫至210℃,維持2分鐘;進樣口溫度為250℃;檢測器溫度為300℃;頂空瓶平衡溫度為100℃,平衡時間為15分鐘。系統適用性要求對照品溶液色譜圖中,各峰間的分離度均應符合要求。測定法取供試品溶液與對照品溶液分別頂空進樣,記錄色譜圖。限度按外標法以峰面積計算,乙醇、丙酮、三氯甲烷與吡啶的殘留量均應符合規定。水分取本品,照水分測定法(通則0832第一法1)測定,含水分不得過6.0%。異常毒性取本品,用氯化鈉注射液制成每1ml中約含克林霉素5mg的溶液,依法檢查(通則1141),應符合規定(供注射用)降壓物質取本品,依法檢查(通則1145),劑量按貓體重每1kg注射5mg(按克林霉素計),應符合規定。(供注射用)細菌內毒素取本品,依法檢查(通則1143),每1mg克林霉素中含內毒素的量應小于0.10EU。(供注射用)無菌取本品,用0.1%無菌蛋白胨水溶液溶解并稀釋制 成每1ml中約含20mg的溶液,經薄膜過濾法處理,用0.1%無菌蛋白胨水溶液分次沖洗(每膜1000ml),以金黃色葡萄球菌為陽性對照菌,依法檢查(通則1101),應符合規定。(供無菌分裝用)