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  • 發布時間:2022-03-28 15:44 原文鏈接: 免疫共沉淀的工作液配置相關

      1. 稱取790mg 的Tris-Base,加到75ml 去離子水中,加入900mg的NaCl,攪拌,直到全部溶解,用HCl調節PH值到7.4

      2. 加10 ml 10%的NP-40

      3. 加2.5 ml 10%的去氧膽酸鈉,攪拌,直到溶液澄清

      4. 加1 ml 100mM的EDTA,用量筒定容到100ml,2-8℃保存

      5. 理論上,蛋白酶和磷酸酯酶抑制劑應該在使用當天同時加入(抑蛋白酶肽,亮抑酶肽,胃蛋白酶抑制劑各100 μl; PMSF, Na3VO4, NaF各500 μl),但是PMSF在水溶液中很不穩定,30分鐘就會降解一半,所以PMSF應該在使用前現加,其他抑制劑成分可以在水溶液中穩定5天。

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