1. 用50 ml 底物緩沖液洗膜兩次以平衡膜,每次15 min。 2. 對于使用硝酸纖維素膜或PVDF膜進行的堿性磷酸酶反應:膜置于Nitro-Block溶液中5 min,然后以50 ml 底物緩沖液洗5 min。 3. 將膜移入顯跡液中,浸泡30 s 或5 min。
4. 取出膜,滴干水份,將膜正面朝下放在一張透明的塑料保鮮膜上,向后折疊用保鮮膜將膜緊密包裹起來。 5. 在暗房中,將膜正面朝下放在感光膠片上,曝光時間取決于樣品,放射自顯影幾秒或過夜。 6. 如果需要,可用50 ml TBS溶液洗膜15 min,再進行發色顯跡。 展 |