為保持組織的抗原性，固定劑不宜過強。
1.包埋前染色
優點是切片染色前不經過鋨酸固定、脫水及樹脂包埋等過程，抗原未被破壞，易于獲得良好的免疫反應。特別適用于含抗原量較少的組織。
2.包埋后染色
優點是超微結構保存較好，方法簡便，陽性結構有高度的可重復性，能在同一張切片上進行多重免疫染色。但抗原活性可能減弱，甚至喪失或者抗原性質發生改變。
3.超薄切片免疫染色
是將組織置于2.3mol/L蔗糖液中，以液氮速凍，冷凍切片。由于不需經固定、脫水、包埋等步驟，直接進行免疫染色，所以抗原性保存較好，兼有包埋前和包埋后染色的優點。