①細胞在480g的離心力條件下離心10min，棄去上清。
②用冷PBS洗細胞兩次，然后將洗過的細胞置于冰上。
③重新懸浮沉淀，使1.0ml裂解液（冷卻到4℃)中含大約1X107?5X107個細胞。
④冰上孵育細胞15min，并不時地振動小管。
⑤4℃條件下20000g離心裂解液10min。
⑥小心地把上清移到另一個小管中，應確保不要碰到沉淀物。將裂解液置于冰上，以備免疫沉淀所用。細胞裂解液可以使用干冰和乙醇的混合物迅速冰凍，-70℃條件下可以長期儲存。但是，通過免疫沉淀分離的蛋白復合物的分析，建議使用新制備的細胞裂解液。 展開 | 