一、血清區帶電泳
血清區帶電泳是測定M蛋白的一種定性實驗,常采用醋酸纖維素膜和瓊脂糖電泳兩種方法。
單克隆丙種球蛋白增高時常在γ區,呈現濃密狹窄的蛋白帶,經掃描顯示為高尖蛋白峰(高:寬>2:1)。
多克隆丙種球蛋白增高時,如慢性感染、自身免疫病和肝病等,γ區帶寬而濃密,掃描圖顯示為寬大的蛋白峰。
有些輕鏈病,或重鏈病的M蛋白峰并不明顯,富含類風濕因子的血清、溶血標本,有些卻可出現類似M蛋白峰的電泳區帶。
二、免疫電泳
血清標本先行區帶電泳分成區帶,繼而用特定的抗血清進行免疫擴散,M蛋白將在適當的部位形成異常沉淀弧。正常人血清形成的沉淀線是均勻的弧形,而M蛋白的沉淀線或沉淀弧較寬,呈弓形或船形。
有時M蛋白的四級結構會影響輕鏈與抗體結合,需在血清中加入2-巰基乙醇(10μl/ml)。否則輕鏈不能檢出,可能會誤診為重鏈病。
將尿標本與血標本一同進行免疫電泳分析會減少檢驗誤差。
三、免疫固定電泳
是血清區帶電泳與免疫沉淀反應相結合的定性實驗,具有更高的靈敏性。
固定電泳后分別在電泳條上加入不同類型的單克隆抗體,相應的抗原將與抗體在某一區帶形成抗原抗體復合物,經漂洗和染色可清晰地顯示出抗原抗體反應帶。
M蛋白在免疫固定電泳中顯示狹窄而界限明確的區帶,而多克隆增殖或正常血清γ蛋白區帶則比較彌散。
四、血清免疫球蛋白定量
免疫球蛋白及輕鏈的定量分析對診斷免疫球蛋白異常增殖性疾病具有重要價值,以免疫比濁分析法為主。
若患者有某一類型免疫球蛋白明顯高出正常值,應考慮血清中有M蛋白的存在。
正常血清中κ/λ比例約為2:1,當κ/λ比例大于4:1或小于1:1時應考慮κ型或λ型M蛋白血癥。
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