⑴ 區帶電泳：玻片瓊脂或醋酸纖維膜電泳均可。加樣電泳后，只在γ—球蛋白的遷移部位出現一條帶。操作時，同時可用全血清樣品，不同濃度 (NH4)2SO4鹽析樣品進行電泳，以資比較。
⑵ 瓊脂雙相雙擴散鑒定：預先準備該IgG免疫異種動物所獲的抗IgG血清。將IgG與抗 IgG血清進行雙相雙擴散，如IgG提純的話，則在兩樣品孔之間出現一條沉淀線。
⑶ 免疫電泳鑒定：（操作見第三章免疫電泳部分）。孔內加待測樣品，電泳后，在槽內加抗IgG血清，瓊脂擴散24h，觀察結果。如果提取的IgG純的話，則只出現一條弧形的沉淀線，且沉淀線位于γ—球蛋白區。此鑒定必須同時進行全血清及抗血清抗體的免疫電泳，以資比較。
⑷ 圓盤電泳鑒定：用全血清樣品及提純樣品同時進行圓盤電泳。全血清樣品在圓盤電泳上出現數十條區帶，而純化的IgG則只有一條區帶。
13．IgG的濃縮與保存
⑴ IgG的濃縮：參看本章第九節。
⑵ IgG 的保存：一般濃縮至1％以上的濃度，再分裝成小瓶凍干保存，或加0.01％硫柳汞在普通冰箱或低溫冰箱保存，注意防止反復凍融
（三）IgG的簡易快速提取法
應用硫酸銨鹽析及DEAE-纖維素層析法提純化的IgG，不僅操作復雜、需時較長，處理過程中樣品體積大大增加，而且透析時變性嚴重，容易引起抗體效價降低等。為了克服這一不足，特別是當大量提取IgG時，則往往采取下列的簡易辦法。
1． DEAE-纖維素直接提取法
取樣品直接過DEAE-纖維素柱。下面介紹的是最為簡單的燒杯法。
⑴ 以一定數量的DEAE52放入燒杯中，加入 0.01Mol/L pH8.0PB緩沖液，靜置30min，去上清細粒，再重復一次。
⑵用布氏漏斗（內放兩層濾紙）過濾。
⑶以5g 濕重的DEAE-纖維素加1ml血清及3ml蒸餾水混合液的比例，加入各成分，充分攪拌。
⑷于4℃中放置1h，中間攪拌數次。
⑸用布氏漏斗抽濾，再用0.01Mol/L pH8.0PB緩沖液沖洗纖維素，抽濾。濾液即為提取的IgG液。
2．DEAE－SephadexA－50
為弱堿性陰離子交換劑，經NaOH將Cl-型轉變為OH-型后，可吸附酸性蛋白，血清中除γ－G屬中性蛋白外其余均屬酸性蛋白。當溶液的pH在6.5時，酸性蛋白均被DEAE－SephadexA－50吸附，只有γ－G留在溶液中。因此利用這一原理可以提取
γ－G。這種提取法流程大大縮短，純化前后樣品體積變化不大，而且所得γ－G無變性現象。經過四次處理，其純度也較好。缺點是收集量少，損耗大。
⑴ DEAE —SephadexA—50的處理。取DEAE－SephadexA－50若干克，懸浮于蒸餾水中，1h后傾去上層小顆粒，然后用
0.50Mol/L NaOH處理1h，蒸餾水洗至中性，再用0.5 Mol/L HCl處理0.5h，水洗至中性，最后以0.01Mol /L
pH6.5PB液平衡、抽干。
⑵ 取一定的血清量，加等量的0.01Mol/L pH6.5PB液，再加液體體積1/4的濾干的 DEAE－SephadexA－50，混合、4℃放置1h，不時攪拌、抽濾、收集濾液。
⑶ 再用同樣重量的DEAE－SephadexA－50 處理濾液。反復處理三次。（全程共四次）。獲得濾液即為γ－G制品。
⑷ DEAE－SephadexA－50的回收。用0.5Mol/L的 Na2HPO4洗脫，抽濾至濾液中無蛋白（OD280﹤0.04）后，再用蒸餾水洗至中性即可回收使用。
（四）禽血清IgG的分離與提純（Na2SO4法）
1．試劑
⑴ 5％葡聚糖硫酸鹽
⑵ 0.02Mol/L MnCl2溶液
⑶ 無水硫酸鈉
⑷ pH8.2 硼酸鹽緩沖液
⑸ 0.06Mol/L pH7.4PB液
2．操作方法
⑴ 取禽血清10ml加5％葡聚糖硫酸鹽液，0.40ml和0.025Mol/L MnCl21.00ml充分混合，靜置，然后離心去沉淀，此步目的是為了去掉脂類物質。
⑵ 于上清液中加無水硫酸鈉使每毫升血清含0.18g，緩慢加入，混勻，靜置30min，3 000r/min離心去上清。
⑶ 以 pH8.2硼酸鹽緩沖液將沉淀稀釋至原血清的一半再加硫酸鈉使成0.16g／ml，同上法離心去上清。
⑷ 重復步驟⑶，加Na2SO4，使成0.14g/ml。
⑸ 以少量硼酸鹽緩沖液溶解沉淀，然后裝透析袋除鹽48h。
⑹ 過SephadexG200柱，收集第一峰和第二峰。第一峰是IgM，第二峰主要是IgG。
⑺ 如要進一步提純，則用第二峰再過DEAE—纖維素柱，以 0.06Mol/L pH7.4 PB液洗脫，洗脫下來的蛋白液即為IgG。
也可以按以下操作方法進行：
⑴ 以18％硫酸鈉（W/V）提取一次，再以14％的硫酸鈉提取一次。
⑵ 將粗提的免疫球蛋白以PBS溶解，按9％加入無水硫酸鈉，離心。再將上清按5％加入無水硫酸鈉，離心。將兩沉淀溶解、混合，在常水中透析過夜，再在生理鹽水中4℃透析，直至無SO42-為止。
⑶ 離心將上清液以pH8.0 0.20Mol/L PBS液平衡。
⑷ 過SephadexG200柱，以pH8.0 0.20Mol/L PBS液洗脫，收集洗脫液，取第二峰即為雞