免疫組化發展及原理

　　1941年Coons首先用熒光素標記抗體—檢測肺組織內的肺炎雙球菌獲得成功。

　　60年代 Akanke建立酶標抗體技術—鐵蛋白標記Ab技術

　　70年代 Stemberger改良上述技術，建立辣根過氧化物酶—抗體過氧化物酶（PAP）技術，使免疫細胞化學得到廣泛應用。

　　80年代 Hsu等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金-銀染色法、半抗原標記法、免疫電鏡技術相繼問世。

　　90年代 分子雜交技術、原位雜交技術、免疫細胞化學分類方法迅速發展。

　　2000年后 各種免疫組化技術更加成熟，使免疫組化技術成為當今生物醫學中形態、功能代謝綜合研究的一項有力工具。

　　免疫組化的原理

　　免疫組織化學（Immunohistochemistry；IHC）也稱為免疫細胞化學，是利用免疫學方法，用已知的特異性抗體（或抗原）對組織細胞中相應的抗原（或抗體）進行檢測，通過化學反應使標記于結合后的特異性抗體上的顯色劑（酶、金屬離子等），顯示出顏色，借助顯微鏡可觀察到組織細胞內標記物顯示出的特異性抗原-抗體結合物（陽性反應）。

　　應用免疫學及組織化學原理，對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究，這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。

　　免疫組化主要利用抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性，即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來，以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實驗動物，制備特異性抗體，再用這種抗體（第一抗體）作為抗原去免疫動物制備第二抗體，并用某種酶（常用辣根過氧化物酶）或生物素等處理后再與前述抗原成分結合，將抗原放大，由于抗體與抗原結合后形成的免疫復合物是無色的，因此，還必須借助于組織化學方法將抗原抗體反應部位顯示出來（常用顯色劑ＤＡＢ顯示為棕黃色顆粒）。通過抗原抗體反應及呈色反應，顯示細胞或組織中的化學成分，在顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應產物，從而能夠在細胞或組織原位確定某些化學成分的分布、含量。組織或細胞中凡是能作抗原或半抗原的物質，如蛋白質、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受體、酶、激素、核酸及病原體等都可用相應的特異性抗體進行檢測。