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  • 發布時間:2019-04-17 20:55 原文鏈接: 免疫組化的試劑準備

    實驗概要

    重要的是選擇好一抗、二抗或者還有三抗,注意抗體的特異性、效價和交叉反應,最好用單抗。

    實驗步驟

    其他常用試劑有:
    1、0.01M(pH7.4)的磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS),稀釋抗體和洗片子用;
    2、清潔液、純水,洗玻片用
    3、多聚賴氨酸處理載玻片,防止脫片
    4、固定液:4%多聚甲醛或冷丙酮等;
    5、15%~30%蔗糖,組織脫水用;
    6、梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋,或者OCT包埋做冰凍切片;
    7、抗原修復液:枸櫞酸緩沖液(pH6.0);
    8、活化劑:EDTA或者Triton X-100;
    9、1%~10%牛血清清蛋白(BSA)封閉液;
    10、H2O2,滅活內源性過氧化物酶;
    11、顯色液:根據你做的酶來選擇,如果是HRP就用DAB,如果是AKP,就用NBT/BCIP,免疫熒光則不需要;
    12、50%緩沖甘油封片液


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