免疫組織化學概念和基本原理

1、概念和基本原理

    免疫組織化學又稱免疫細胞化學，是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應，對相應抗原進行定位、定性、半定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性和組織化學的可見性巧妙地結合起來，借助顯微鏡的現像和放大作用，在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質，并可在原位顯示相應的基因和基因表達產物。免疫組織化學方法種類現已有：免疫熒光組織（細胞）化學技術、免疫酶組織（細胞）化學技術、親和組織化學技術、免疫金銀及鐵標記免疫組織化學技術等。

    免疫熒光組織（細胞）化學技術是采用熒光素標記的已知抗體（或抗原）作為探針，檢測待測組織、細胞標本中的靶抗原（或抗體），形成的抗原抗體復合物上帶有熒光素，在熒光顯微鏡下，由于受高壓汞燈光源的紫外光照射，熒光素發出明亮的熒光，這樣就可以分辨出抗原（或抗體）的所在位置及其性質，并可利用熒光定量技術計算抗原的含量，以達到對抗原物質定位、定性、半定量測定的目的。

2、標本制作

    免疫熒光一般用冰凍切片，減少雜質干擾；而酶免疫組化一般用石蠟切片或冰凍切片均可以。

3、實驗步驟

    免疫熒光染色步驟簡單，而酶免疫組化方法較為復雜，多了DAB顯色過程、脫水等步驟。

4、染色后的標本保存

    免疫熒光染色后的標本一般短時間拍照，時間長了熒光衰退，建議不要長期保存；而酶免疫組化染色切片經過脫水、透明和封片等可以長期保存。抗體