PBS稀釋。當然最好用封閉液直接稀釋，再加一點TritonX100效果好。
培養液成分太多了。而且固定之后細胞都死了，用培養液沒什么意義，只要保證其pH等條件適合就好了。
抗體說明書上都會有推薦的稀釋倍數。上網查一下，有很多protocol。一般一比幾百到一萬都有，依抗體而定。可以4度過夜，這樣染色效果好。
二抗一般較便宜，一般1：50到1：200多。
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