二、干擾的排查和發現
事實上各個廠家所提供的產品說明書常不能夠全面反映試劑組成的情況,而生化反應的影響因素又是相當復雜的。因此,通過實驗發現試劑交叉污染可能帶來的干擾顯得更加重要。具體可以通過以下幾個試驗來排查和發現試劑間可能發生的干擾。
1.將某一試劑作為樣本進行全套項目測定,考察結果的情況,進而確定發生試劑交叉污染時造成直接干擾的項目;雙試劑的R1、R2兩種都要做,這樣在解決干擾時有針對性。
2.1 份樣本分為兩份,一份加生理鹽水或其他適當的稀釋液,另一份加等量的試劑,同時測定、考察結果的變化,進而確定可能發生試劑交叉污染時造成干擾的項目[6]。
3.懷疑A項試劑對B項目存在干擾,可以用樣本先單做B項目若干次;然后先做A項目,接著做B項目若干次。通過統計學分析,可以知道A試劑通過試劑針對B項目的干擾程度。
三、干擾的消除
通過以上常見試劑間相互干擾的原因的分析及試劑干擾的排查的試驗,應可以有針對性采取一些措施消除試劑間的干擾,常用的方法有下面幾種:
1.為減少試劑間的相互干擾,應定期對儀器進行適當的保養,如更換管道,用去污劑、酸性洗液清洗比色杯,用去污劑擦清試劑針,用苯甲醇擦洗攪拌棒等。
2.合理安排檢測項目的順序:一般在安排項目順序時要求兩個項目間至少要有一個非干擾項目,而最徹底的做法則是將被干擾項目置于干擾項目之前,以消除干擾發生的可能。同時要求檢驗人員對儀器的工作狀態要了如指掌,并在一個樣本的項目選擇或一個樣本的最后一項與下一樣本的第一個項目選擇時對于試劑交叉污染的可能性加以考慮,合理安排項目順序,以便得到更為合理的結果[7]。對常見的生化項目可以按以下順序安排檢測:P、Alb、DBIL、TBIL、K、Ca、CK、TBA、TG、AFU、ALT、CK-MB、APOA1、T-CH、APOB、Cl、HDL-C、LP(a)、AST、GPDA、AMY、LDL-C、BUN、UA、CHE、ADA、r-GT、Mg、Na、ALP、LDH、GPDA、TP、Cr。
3.一些生化分析儀還有額外的沖洗功能,可以在被干擾項目檢測前對試劑針,比色杯用酸性洗液、堿性洗液進行2次或多次沖洗,以減少項目間的交叉污染。
4.有的全自動化分析儀器有不同的通道,可以將有干擾的項目排在不同的通道中檢測。
5.選用具有抗交叉污染的試劑盒:如在游離膽固醇試劑中添加膽固醇酯抑制劑,以減少膽固醇酯酶水解膽固醇酯引起對游離膽固醇測定的污染。
通過以上幾種方法,大部分試劑間的交叉污染能夠被解決,實際工作中,用全自動生化分析儀進行連續的多個項目的測定,每個反應的詳細過程難以探知,因此要求我們在實際工作中必須對生化分析儀的工作原理,方法,流程,狀態非常了解,還須對試劑的組成,反應原理作深入的分析,理論分析結合實際應用,方可以摸索出一套符合本單位工作的方法。